豬鏈球菌2型小型豬動(dòng)物感染模型的建立及其體內(nèi)動(dòng)態(tài)分布的研究.pdf

1、豬鏈球菌2型(SS2)引起的疫病不但給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，也給公共衛(wèi)生和食品安全帶來(lái)了威脅，已成為受到全球關(guān)注的人獸共患病。但迄今為止，對(duì)SS2致病性方面的研究尚不夠深入，其中對(duì)SS2在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)分布更不十分清楚，影響了對(duì)該菌致病機(jī)制的研究，因此迫切需要建立一種能模擬自然感染發(fā)病動(dòng)物臨床癥狀和病理變化的動(dòng)物模型，以深入研究其感染的體內(nèi)動(dòng)態(tài)分布、感染機(jī)制、和免疫應(yīng)答，該模型的建立對(duì)SS2的研究和控制具有重要意義。 （1）豬鏈球

2、菌2型小型豬動(dòng)物感染模型的建立。本實(shí)驗(yàn)選用SPF巴馬小型豬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，可有效排除其陰性帶菌和混合感染，具有體型小、方便飼養(yǎng)和易于管理等優(yōu)點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)采用豬鏈球菌2型四川分離株ZY05719為攻毒菌株，通過(guò)肌肉注射感染巴馬小型豬，建立豬鏈球菌2型感染小型豬的動(dòng)物模型，結(jié)果顯示豬鏈球菌2型可人工感染巴馬小型豬，癥狀明顯，其臨床癥狀和病理變化等表現(xiàn)與自然狀態(tài)發(fā)病一致，模型重復(fù)性好。 （2）豬鏈球菌2型在小型豬模型動(dòng)物體內(nèi)的分布。在建立上述

3、模型的基礎(chǔ)上，將21只1月齡SPF巴馬小型豬隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)組14頭，對(duì)照組7頭，分別接種四川株ZY05719和無(wú)菌培養(yǎng)基。分別于攻毒后第1d、2d、3d、4d、6d、8d、10d剖檢仔豬觀察其病理變化規(guī)律，利用細(xì)菌分離及PCR方法檢測(cè)SS2在體內(nèi)各組織中的分布情況和變化規(guī)律。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)SS2侵入血液的速度很快；扁桃體是該菌的定植器官，SS2對(duì)肝臟，腎臟等實(shí)質(zhì)器官的黏附性無(wú)明顯差異；只有出現(xiàn)神經(jīng)癥狀及死亡仔豬，才能從腦組織中分離到SS2，說(shuō)

4、明細(xì)菌突破血腦屏障，進(jìn)入大腦可能是引發(fā)腦膜炎的前提；另外本實(shí)驗(yàn)建立PCR方法直接從組織中檢測(cè)SS2，具有特異、敏感、快捷的特點(diǎn)。 （3）豬鏈球菌2型在模型動(dòng)物血液中的消長(zhǎng)規(guī)律。將6頭SPF巴馬小型豬隨機(jī)分為2組，按照建立模型的方法攻毒，攻毒后分別于6h、12h、24h、48h直到第10d觀察臨床癥狀，并無(wú)菌采血，利用細(xì)菌菌落總數(shù)計(jì)數(shù)和熒光定量PCR方法來(lái)檢測(cè)血液中SS2的消長(zhǎng)規(guī)律。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)SS2進(jìn)入血液的速度很快，攻毒后6~12