助孕3號方對自然流產(chǎn)T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞、Fas-FasL表達(dá)干預(yù)的研究.pdf

1、目的:本課題通過研究助孕3號方對自然流產(chǎn)患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞的影響以及助孕3號方對腎虛黃體抑制流產(chǎn)模型孕鼠外周血T淋巴細(xì)胞亞群、蛻膜組織Fas/FasL表達(dá)干預(yù)的影響，深入探討自然流產(chǎn)的免疫學(xué)發(fā)病機制和中藥助孕3號方安胎的機理。 方法: 1．臨床研究：所有受試病例必須按照診斷標(biāo)準(zhǔn)、納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行篩選，選取早期自然流產(chǎn)脾腎虛型患者30例做為實驗組與正常早孕婦女15例做為對照組，檢測正常早孕婦女外周血中

2、CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及NK細(xì)胞百分含量，并比較實驗組服用助孕3號方前和服藥兩周后外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及NK細(xì)胞百分含量，進(jìn)一步探討助孕3號方治療自然流產(chǎn)脾腎虛型的作用機理。 2．實驗研究：以羥基脲+米非司酮建立腎虛黃體抑制病證結(jié)合流產(chǎn)模型。隨機將46只雌性受孕SD大鼠分為4組：助孕3號方組、黃體酮組、模型組、正常妊娠組，通過檢測這四組孕鼠孕第11天外周血中CD3+、

3、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和蛻膜組織Fas和FasL的表達(dá)，進(jìn)一步研究自然流產(chǎn)的發(fā)病機制，探討助孕3號方治療自然流產(chǎn)的免疫學(xué)作用機理。 研究結(jié)果: 1．臨床研究：實驗組在服用助孕3號方前和對照組比較，CD3+變化無顯著性差異(P>0.05)；CD4+、CD4+/CD8+增高，有非常顯著性差異(P<0.01)；CD8+降低，有顯著性差異(P<0.05)；NK細(xì)胞百分含量增高，有顯著性差異(P<0.05)；血β-

4、HCG定量明顯降低，有非常顯著性差異(P<0.01)。服用助孕3號方兩周后，治療組30例，其中29例有效，1例妊娠維持超過既往流產(chǎn)天數(shù)后再次自然流產(chǎn)，總有效率96.7％。實驗組用藥后比用藥前CD3+變化無顯著性差異(P>0.05)；用藥后CD8+增高，CD4+、CD4+/CD8+、NK細(xì)胞百分含量降低，有非常顯著性差異(P<0.01)；血β-HCG定量用藥后比用藥前明顯升高，有非常顯著性差異(P<0.01)。 2．實驗研究：四組

5、比較，CD3+、CD8+的差別無顯著性差異(P>0.05)。造模組CD4+、CD4+/CD8+最高，與其他三組比較有非常顯著性差異(P<0.01)。助孕3號組、黃體酮組與造模組比較，CD4+、CD4+/CD8+明顯降低，有非常顯著性差異(P<0.01)。助孕3號組、黃體酮組與正常妊娠組比較，CD4+、CD4+/CD8+無顯著性差異(P>0.05)。造模組與正常妊娠組比較，蛻膜組織Fas表達(dá)的平均染色指數(shù)明顯增高，有非常顯著性差異(P<0

6、.01)。助孕3號組、黃體酮組與造模組比較Fas表達(dá)均明顯減低，有明顯的差異性(P<0.01)。助孕3號組、黃體酮組與正常妊娠組比較，F(xiàn)as變化不明顯，差異不具有顯著性(P>0.05)。造模組與正常妊娠組比較，F(xiàn)asL表達(dá)的平均染色指數(shù)降低，有顯著性差異(P<0.05)。助孕3號組、黃體酮組與造模組比較FasL表達(dá)均增高，有顯著性差異(P<0.05)。助孕3號組、黃體酮組和正常妊娠組比較，F(xiàn)asL染色強度指數(shù)變化不明顯，差異不具有顯著性

7、(P>0.05)。 結(jié)論: 1．早期自然流產(chǎn)患者外周血中CD4+含量和CD4+/CD8+比值明顯上升，CD8+含量下降，NK細(xì)胞百分?jǐn)?shù)增多。T淋巴細(xì)胞亞群比例的失調(diào)，外周血NK細(xì)胞含量的升高可能是自然流產(chǎn)的發(fā)病原因之一。本研究顯示，補腎健脾復(fù)方助孕3號方可以使早期自然流產(chǎn)患者外周血中CD8+增高、使CD4+、CD4+/CD8+和NK細(xì)胞含量降低。 2．腎虛黃體抑制流產(chǎn)孕鼠與正常早孕大鼠比較，外周血中CD3+、CD

8、8+無明顯變化，CD4+、CD4+/CD8+有明顯升高，蛻膜組織的Fas表達(dá)增高，F(xiàn)asL表達(dá)降低，提示早期流產(chǎn)淋巴細(xì)胞亞群比率失調(diào)，細(xì)胞免疫功能過度，F(xiàn)as/FasL介導(dǎo)的AICD機制平衡失調(diào)，導(dǎo)致妊娠丟失。 3．助孕3號方可以降低腎虛黃體抑制流產(chǎn)孕鼠外周血CD4+、CD4+/CD8+，糾正淋巴細(xì)胞亞群比率失調(diào)，還可以增加蛻膜組織FasL表達(dá)、降低Fas表達(dá)。由此推出，助孕3號方可能通過糾正淋巴細(xì)胞亞群比率失調(diào)，恢復(fù)CD8+T