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文檔簡介
1、目的:從中醫(yī)肝腎與衰老的關系入手,采用D-半乳糖(D-gal)頸背部皮下注射方法建立亞急性衰老大鼠模型,觀察補腎填精疏肝法對實驗大鼠胸腺重量指數,血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),腦組織去甲腎上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羥色胺(5-HT),肝、腎臟組織形態(tài)結構等指標的影響,從免疫、自由基、神經、形態(tài)學角度初步探討補腎填精疏肝法延緩衰老的作用機制,為以后的實驗及臨床研究打下基礎。 方法: 1.分組:清
2、潔級wistar雄性大鼠50只,體重280±10g,隨機分為5組,即正常對照組,模型組、補腎填精組、疏肝組、補腎填精疏肝組。 2.造模:將D-半乳糖溶于生理鹽水中,配成濃度為5%的D-半乳糖溶液。除正常對照組外,余四組大鼠均頸背部皮下注射D-半乳糖100mg/kg,每日一次,連續(xù)42天。 3.給藥:造模第11天開始灌胃給藥,補腎填精組、疏肝組、補腎填精疏肝組分別用補腎填精方、疏肝方、補腎填精疏肝方灌胃,每日一次。
3、 4.檢測:造模結束后即實驗第43天取血、腦、胸腺、肝、腎等組織,檢測實驗大鼠胸腺重量指數,血清SOD、MDA,腦組織NE、DA、5-HT等指標,觀察肝、腎臟組織結構的變化。 結果:八天后模型組大鼠即出現精神萎靡少動,行動遲緩,皮毛枯黃,失去光澤,皮膚彈性下降,眼球混濁不清等衰老體征,持續(xù)加重直到實驗結束。 1.免疫學指標的比較對胸腺重量指數的影響:與正常對照組比較,模型組胸腺重量指數明顯降低(P<0.01);與模型組比
4、較,補腎填精組、補腎填精疏肝組能顯著提高胸腺重量指數(P<0.05);各治療組之間比較,以補腎填精組、補腎填精疏肝組療效較優(yōu)(P<0.01)。 2.自由基指標的比較。 2.1 對血清SOD的影響:與正常對照組比較,模型組SOD含量明顯下降(P<0.01);與模型組比較,各治療組均可顯著提高SOD的療效(P<0.01);各治療組之間比較,以補腎填精組、補腎填精疏肝組療效較優(yōu)(P<0.01)。 2.2對血清MDA的
5、影響:與正常對照組比較,模型組MDA含量明顯升高(P<0.01);與模型組比較,各治療組均能明顯降低MDA的含量(P<0.01);各治療組之間比較,補腎填精疏肝組降低MDA含量的療效較優(yōu)(P<0.05或P<0.01)。 3.單胺類神經遞質指標的比較。 3.1對腦組織NE的影響:與正常對照組比較,模型組NE含量明顯降低(0.01);與模型組比較,補腎填精組、補腎填精疏肝組有明顯提高NE含量的療效(P<0.01);各治療組之
6、間比較,補腎填精疏肝組療效較優(yōu)(P<0.01)。 3.2對腦組織DA的影響:與正常對照組比較,模型組DA含量明顯降低(P<0.01);與模型組比較,各治療組均有極顯著提高DA含量的療效(P<0.01);各治療組之間比較,補腎填精組、補腎填精疏肝組的療效較優(yōu)(P<0.01)。 3.3對腦組織5-HT的影響:與正常對照組比較,模型組5-HT的含量有所下降(P<0.01),補腎填精疏肝組無顯著性差異(P<0.05);與模型組比
7、較,各治療組均能不同程度的提高5-HT的含量;各治療組之間比較,補腎填精疏肝組提高5-HT含量的療效較優(yōu)(P<0.05或P<0.01)。 4.肝、腎臟組織形態(tài)結構的比較。 4.1對肝臟組織結構的影響:與正常對照組比較,模型組肝小葉結構不清,肝細胞排列紊亂,體積增大,呈水樣及氣球樣變性,胞漿可見明顯的疏松、腫脹,灶性壞死,大部分肝竇消失不見;與模型組比較,各治療組對肝細胞、肝竇、炎細胞等方面均有不同程度的改善,其中補腎填精
8、疏肝組效果最優(yōu)。 4.2對腎臟組織結構的影響:與正常對照組比較,模型組腎小球體積普遍增大,可見球內毛細血管萎縮,細胞核深染、固縮,球囊腔增寬,內可見蛋白性滲出物,大部分腎小管呈囊性擴張,上皮細胞空泡變性,蛋白管型較多見,間質細胞增生較多;與模型組比較,各治療組對腎小球、腎小管、上皮及間質細胞等方面均有不同程度的改善,其中補腎填精疏肝組效果最優(yōu)。 結論: 1.補腎填精疏肝法提高亞急性衰老模型大鼠胸腺重量指數、血清S
9、OD、腦組織NE、DA、5-HT含量,降低血清MDA含量,改善肝、腎臟組織形態(tài)結構損傷的療效最優(yōu)。 2.補腎填精、疏肝、補腎填精疏肝三方對亞急性衰老模型大鼠均有不同程度的增強免疫功能、抗氧化、清除自由基、恢復單胺類神經遞質代謝水平、改善肝、腎臟組織結構損傷的作用,治療效果為補腎填精疏肝方優(yōu)于前二者,說明補腎填精法、疏肝法均是抗衰老的有效方法,而二者結合的治療效果更優(yōu)。 3.衰老是一個全身各系統(tǒng)逐漸衰退的過程,因此研究衰老
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