鏈霉菌182-2抗真菌活性物質(zhì)的分離及抑菌特性的初步研究.pdf

1、鏈霉菌182-2代謝產(chǎn)生的抗真菌活性物質(zhì)生物活性高，且性質(zhì)穩(wěn)定，其發(fā)酵液對煙草赤星、蘋果斑點落葉和番茄早疫等鏈格孢屬真菌有良好的抑制作用，具有開發(fā)為工業(yè)化產(chǎn)品的價值。本文主要以煙草赤星病菌為靶標(biāo)，對該抗真菌活性物質(zhì)進行了初步的分離純化，并對初步純化物的抑菌特性進行了研究。
　　(1)通過對發(fā)酵液進行預(yù)處理，除去了發(fā)酵液中的菌絲體、剩余培養(yǎng)基成分、一些高價離子和發(fā)酵過程中產(chǎn)生的其它代謝產(chǎn)物。
　　(2)采用活性炭吸附法，對預(yù)處

2、理后的發(fā)酵液進行純化脫色。結(jié)果表明活性物質(zhì)的最佳吸附條件為:1.5mm柱狀活性炭為最佳吸附活性炭;活性炭與發(fā)酵液的用量比為0.5g/mL;吸附溫度28℃;搖床轉(zhuǎn)速60r/min;吸附時間4h。活性物質(zhì)的最佳洗脫條件為:50％丙酮為最佳洗脫劑;洗脫溫度28℃;搖床轉(zhuǎn)速60r/min;洗脫時間4h。發(fā)酵液經(jīng)活性炭純化脫色后，脫色率達77％，當(dāng)其濃度為2000μg/mL時，抑菌圈直徑為42mm。
　　(3)經(jīng)活性炭純化脫色后的粗提物采用

3、大孔樹脂柱層析法分離純化。粗提物柱層析分離條件為:H103為吸附樹脂;上樣量為20mL(2mg/mL);吸附流速為0.5mL/min;50％的丙酮為洗脫劑;洗脫流速為1mL/min。經(jīng)大孔樹脂吸附法純化后，去掉了大部分的雜質(zhì)，得到兩個活性峰（峰Ⅰ和峰Ⅱ）。由此可見，該抗真菌活性物質(zhì)至少含有兩種有效組分。由于活性峰Ⅰ的抑菌效果較弱，且收集到的量較少，所以選擇活性峰Ⅱ進行下步研究。
　　(4)以煙草赤星病菌為研究對象，對大孔樹脂純化后