負荷量氟伐他汀預處理對在體大鼠心肌缺血再灌注損傷保護作用的研究.pdf

1、目的:缺血再灌注損傷嚴重阻礙缺血心肌的功能恢復。研究發(fā)現(xiàn)，短期他汀類藥物預處理可發(fā)揮與經(jīng)典的缺血預適應相似的保護作用，但該保護作用是否存在“第二窗口”目前尚無定論。本研究旨在觀察負荷量氟伐他汀(80mg/kg)預處理對在體大鼠心肌缺血再灌注損傷的實效性保護作用是否具有“第二時間窗”，并比較其與經(jīng)典的缺血預適應保護作用的強弱。
　　 方法:84只SD大鼠(SPF級，體重250g-300g，(11±1)周齡，由河北醫(yī)科大學實驗動物中

2、心提供）隨機分為12組(n=7)。每組中隨機抽取1只大鼠，留取心肌組織標本，用于HE染色及透射電鏡觀察。氟伐他汀鈉膠囊溶于生理鹽水(20mg/ml)，以80mg/kg劑量灌胃(每只大鼠約1.1ml)。
　　 (1)空白對照組（sham組）:術(shù)前灌胃等量生理鹽水。開胸后于左心耳下方2mm-3mm處的前降支下穿線，關(guān)胸平衡10min，其后繼續(xù)靜置150min;
　　 (2)缺血再灌注組（R/I組）:術(shù)前灌胃等量生理鹽水。開胸

3、、穿線后關(guān)胸平衡10min，制備為在體大鼠心肌R/I模型。
　　 (3)氟伐他汀預處理組（F組）:分為氟伐他汀預處理1h(F1h)、2h(F2h)、4h(F4h)、6h(F6h)、12h(F12h)、24h(F24h)、48h(F48h)、72h(F72h)組。分別于前降支阻斷前相應時間以氟伐他汀80mg/Kg灌胃，開胸、穿線步驟同前，制備為在體大鼠心肌R/I模型。
　　 (4)缺血預處理組（IPC組）:分為缺血預適應快

4、速相組（IPC-1組）、缺血預適應延遲相組（IPC-2組）。術(shù)前灌胃等量生理鹽水。開胸、穿線步驟同前，IPC-1組制備為在體大鼠心肌IPC保護模型;IPC-2組制備為在體大鼠心肌IPC延遲保護模型。
　　 本研究采用完全阻斷前降支血流30min，后開通冠脈再灌注120min的方法制備在體大鼠心肌R/I模型;采用缺血5min，復灌5min，循環(huán)3周期，后完全阻斷前降支血流30min，再開通冠脈再灌注120min的方法制備在體大鼠心

5、肌IPC保護模型;采用缺血5min，復灌5min，循環(huán)3周期，關(guān)胸靜置24h，后完全阻斷前降支血流30min，再開通冠脈再灌注120min的方法制備在體大鼠心肌IPC延遲保護模型。觀察記錄各組體重、心率及心律失常情況并評分;檢測血清LDH、CK-MB;伊文氏藍及TTC染色標記異常心肌，量化為心肌缺血或梗死質(zhì)量比及面積比;光鏡及透射電鏡下比較各組損傷最嚴重部位心肌形態(tài)學改變。
　　 結(jié)果:
　　 1、數(shù)據(jù)納入及剔除情況

6、r>　　 Sham組心肌顏色、心電圖無明顯改變;其余組選擇性納入結(jié)扎及復灌后心肌顏色、心電圖均發(fā)生相應改變的大鼠的數(shù)據(jù)。未及實驗結(jié)束即發(fā)生頑固性心室顫動或心臟驟停者予以剔除。
　　 2、基本指標情況
　　 各組體重(W)、左室重量(LV)及開胸前、結(jié)扎后、復灌后心率（HR）差異無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。
　　 3、氟伐他汀預處理對心肌IRI影響的情況
　　 與I/R組相比，除F12h組、F24h組

7、外余各組梗死面積比明顯降低（均P＜0.05）。其中F4h組梗死面積比較F1h組、F12h組、F24h組、F48h組、F72h組顯著降低（均P＜0.05）;較F2h組、F6h組有減少趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。F48h組梗死面積比較F12h組、F24h組降低顯著（均P＜0.05），較F72h組有減少趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)?？梢娯摵闪糠ニ☆A處理減少心肌I/R后梗死心肌面積的作用出現(xiàn)兩個時相，第一時相約1h

8、即可存在，4h附近為保護作用最強點，并持續(xù)5h以上;第二時相作用較弱，24h后逐漸出現(xiàn)，峰值約在48h，持續(xù)時間大于24h。其他指標亦出現(xiàn)近似趨勢，故擇F4h、F48h組數(shù)據(jù)與IPC-1組、IPC-2組進行下一步比較。
　　 4、氟伐他汀預處理與IPC對心肌IRI影響的比較
　　 4.1、減輕心肌梗死的情況
　　 4.1.1、梗死面積比情況
　　 與I/R組相比，F(xiàn)4h、F48h組及IPC各組梗死面積比均

9、明顯降低（均P＜0.05）。IPC-1組梗死面積較F4h組顯著降低(P＜0.05);F48h組梗死面積較IPC-2組有減少趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　 4.1.2梗死質(zhì)量比情況
　　 與I/R組相比，F(xiàn)4h、F48h組及IPC各組梗死質(zhì)量比均明顯降低(均P＜0.05)。IPC-1組梗死質(zhì)量比較F4h組顯著降低(P＜0.05)，但F48h組梗死質(zhì)量較IPC-2組顯著降低(P＜0.05)。
　　

10、4.2、減輕心肌缺血的情況
　　 4.2.1、缺血面積比情況
　　 與I/R組相比，F(xiàn)4h、F48h組及IPC各組缺血面積比均明顯降低（均P＜0.05）。IPC-1組缺血面積比較F4h組顯著降低(P＜0.05)，但F48h組與IPC-2組相比，缺血面積比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　 4.2.2、缺血質(zhì)量比情況
　　 與I/R組相比，F(xiàn)4h、F48h組及IPC各組缺血質(zhì)量比均明顯降低（均P＜0.

11、05）。IPC-1組缺血質(zhì)量比較F4h組顯著降低（P＜0.05），IPC-2組缺血質(zhì)量比較F48h組顯著降低(P＜0.05)。
　　 4.3、心律失常評分情況
　　 與I/R組相比，F(xiàn)4h、F48h組及IPC各組心律失常評分均明顯降低(均P＜0.05)。F4h組、IPC-1組間心律失常評分差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，F(xiàn)48h組與IPC-2組間心律失常評分差異亦無無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 4.4、

12、降低血清心肌損傷標志物情況
　　 4.4.1、血LDH水平
　　 與I/R組相比，F(xiàn)4h、F48h組及IPC各組血LDH水平明顯均降低(均P＜0.05)，其中IPC-1組血LDH水平較F4h組顯著降低(P＜0.05)，而F48h組與IPC-2組之間血LDH水平差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 4.4.2、血CK-MB水平
　　 與I/R組相比，F(xiàn)4h、F48h組及IPC各組血CK-MB水平均明顯降

13、低（均P＜0.05）。IPC-1組血CK-MB水平較F4h組顯著降低(P＜0.05)，而F48h組與IPC-2組之間血CK-MB水平差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 5、光鏡下心肌組織改變
　　 Sham組大鼠心肌纖維結(jié)構(gòu)完整，細胞形態(tài)規(guī)。余處理組心肌纖維結(jié)構(gòu)完整性遭到破壞，細胞形態(tài)不規(guī)。
　　 6、透射電鏡下心肌組織改變
　　 Sham組心肌細胞較為正常;I/R組心肌細胞破壞嚴重;F4h組及IP

14、C-1組心肌細胞受損程度相近，較I/R組明顯減輕;F48h組及IPC-2組心肌細胞受損程度相近，較I/R組輕，但不及F4h組及IPC-1組。
　　 結(jié)論:
　　 1、負荷量氟伐他汀預處理（80mg/kg）對心肌缺血的保護作用存在兩個時相，第一時相迅速而強大，1h即可存在，4h附近為保護作用最強點，持續(xù)5h以上;第二時相作用較弱，24h后逐漸出現(xiàn)，峰值約在48h左右，持續(xù)時間大于24h。
　　 2、相較于IPC，負