中藥黃芩活性成分分析方法研究及不同產(chǎn)地藥材差異甄別.pdf

1、黃芩，作為傳統(tǒng)中藥，不但被廣泛應(yīng)用于多種中藥復(fù)方制劑，也被用作食品添加劑，在許多方面都顯示較強(qiáng)的生物活性。目前，對于黃芩的研究主要集中于黃芩根中的黃酮類化合物，有關(guān)其地上部分活性物質(zhì)的研究相對較少；同時相關(guān)文獻(xiàn)報道，黃芩中也含有微量的有機(jī)酸類化合物，顯示強(qiáng)的活性，為其另一種有效成分。為了全面研究黃芩中的活性成分，更準(zhǔn)確地評價藥材質(zhì)量，本工作主要針對黃芩中兩類活性成分建立了三種分析方法；建立了不同產(chǎn)地黃芩地上部分和地下部分的綜合指紋譜庫；

2、此外，采用相似度評價和聚類分析對不同產(chǎn)地藥材進(jìn)行了差異甄別，對黃芩的質(zhì)量控制具有實(shí)際意義。
　　 本文主要做了以下工作：
　　 1.以HPLC-DAD聯(lián)用分析技術(shù)為手段，建立了黃芩液相色譜指紋分析方法。內(nèi)容包括：
　　 (1)黃芩根、莖、葉中活性成分的提取方法和液相色譜條件的優(yōu)化以及方法學(xué)驗(yàn)證等，使建立的液相色譜指紋分析方法具備特征性、穩(wěn)定性、系統(tǒng)性及可靠性。
　　 (2)結(jié)合色譜保留及紫外光譜數(shù)據(jù)特征，

3、對最優(yōu)條件下所得的黃芩根、莖、葉的指紋圖譜進(jìn)行定性分析。
　　 (3)對30個不同產(chǎn)地的黃芩根和16個不同產(chǎn)地的黃芩莖、葉中黃芩苷的含量進(jìn)行分析。
　　 (4)對不同產(chǎn)地的黃芩進(jìn)行指紋分析，將所得指紋圖譜分別導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)A版》進(jìn)行譜峰匹配分析，最終成功建立了不同產(chǎn)地黃芩根、莖、葉的綜合指紋譜庫。
　　 2.以HPLC/ESI-MS分析技術(shù)為手段，建立了黃芩根、莖、葉中微量酚酸類成分分析方法

4、。內(nèi)容包括：
　　 (1)黃芩根、莖、葉中有機(jī)酸類成分的提取方法、液相色譜條件、質(zhì)譜條件的優(yōu)化以及方法學(xué)的考察等，使建立的HPLC/ESI-MS分析方法具備靈敏度高，重復(fù)性、穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確度高的特性。
　　 (2)采用離子阱質(zhì)譜儀對分離出的目標(biāo)物進(jìn)行二級質(zhì)譜裂解，根據(jù)母離子、二級質(zhì)譜裂解特征及色譜保留實(shí)現(xiàn)全定性，最終從黃芩根、莖、葉中定性出6種有機(jī)酸類化合物。
　　 (3)對黃芩根、莖、葉中三種活性較高的有機(jī)酸進(jìn)

5、行了定量分析，并成功應(yīng)用于河北承德道地藥材的分析。
　　 3.以新型DCBI-MS分析技術(shù)為手段，建立了黃芩根中黃酮類化合物的快速鑒定分析方法。內(nèi)容包括：
　　 (1)考察不同的樣品制備方法、不同的質(zhì)譜監(jiān)測模式、不同的離子源解吸溫度等重要因素對質(zhì)譜響應(yīng)信號的影響，從而確定高通量、高靈敏度的DCBI-MS分析的最佳條件。
　　 (2)采用離子阱質(zhì)譜儀對分析出的目標(biāo)物進(jìn)行二級質(zhì)譜裂解，根據(jù)母離子和二級質(zhì)譜裂解特征實(shí)現(xiàn)

6、全定性分析；最終鑒定出12種黃酮苷元。
　　 (3)將新型DCBI-MS與通用的HPLC-UV分析方法進(jìn)行對比，實(shí)現(xiàn)優(yōu)勢互補(bǔ)；最終成功應(yīng)用于11個不同產(chǎn)地黃芩藥材的分析。
　　 4.基于液相色譜指紋圖譜甄別不同產(chǎn)地黃芩藥材成分差異的研究。內(nèi)容包括：
　　 (1)對不同產(chǎn)地的黃芩根、莖、葉進(jìn)行指紋圖譜分析，選取相似度匹配較高批次(>0.85)建立三類樣品的共有模式，進(jìn)行指紋圖譜比較。
　　 (2)采用SPS