大蒜藥材物質(zhì)群特征成分分析及質(zhì)量研究.pdf

1、目的：大蒜（Allium Sativum L.）是具有數(shù)千年歷史的藥食兩用植物，作為藥材、食品補充劑、草藥列入各國藥典，但其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)存在較大差異，特別是中國藥典中大蒜質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與國際標(biāo)準(zhǔn)還存在較大差距。本研究參照國外藥典對大蒜質(zhì)量進行研究，為2010版《中國藥典》中大蒜質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)修訂提供參考；根據(jù)國內(nèi)外公認(rèn)的活性成分群，研究大蒜藥材氨基酸類和含硫化合物類物質(zhì)群 TLC、HPLC指紋圖譜，采用幾種數(shù)學(xué)模式提取與表達(dá)指紋圖譜提供的物質(zhì)群特征

2、成分信息，篩選出能夠?qū)Σ煌[屬植物之間的真?zhèn)?、不同產(chǎn)地大蒜之間的品質(zhì)優(yōu)劣進行評價的有效方法；探討大蒜微乳薄層鑒別方法，并用于大蒜二維薄層研究，為大蒜薄層鑒別提供新技術(shù)。
　　方法：
　　1.采用TLC分別建立大蒜中氨基酸類和含硫化合物類物質(zhì)群薄層指紋圖譜，并對不同蔥屬植物、不同產(chǎn)地大蒜的物質(zhì)群TLC指紋圖譜進行相似度分析、聚類分析、主成分分析、數(shù)值分類法分析，提取與表達(dá)大蒜物質(zhì)群TLC指紋特征。
　　2.采用HPLC分

3、別建立大蒜中氨基酸類和含硫化合物類物質(zhì)群HPLC指紋圖譜，采用相同的幾種數(shù)學(xué)模型對兩類物質(zhì)群HPLC指紋圖譜進行分析。
　　3.參照國外藥典分別建立大蒜薄層鑒別和含量測定方法，增加水分、總灰分、酸不溶性灰分檢查項。撰寫大蒜質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）及起草說明。
　　4.采用微乳薄層鑒別大蒜中氨基酸，并用于大蒜二維薄層。
　　結(jié)果：
　　1.大蒜氨基酸類和含硫化合物類物質(zhì)群 TLC指紋圖譜的條件分別為正丁醇：冰醋酸：水=4：

4、1：1和甲苯：乙酸乙酯=10：3，各化合物群得到有效分離。但各種數(shù)學(xué)方法對特征成分提取后未能有效分類。
　　2.大蒜氨基酸類化合物采用異硫氰酸苯酯衍生化，18種氨基酸均達(dá)到有效分離；含硫化合物類物質(zhì)在1％甲酸-甲醇梯度洗脫條件下獲得10個有效分離色譜峰；各種數(shù)學(xué)方法提取數(shù)據(jù)進行分析，氨基酸類物質(zhì)群夜相指紋圖譜的數(shù)學(xué)表達(dá)未能將大蒜和其它蔥屬植物有效區(qū)分，但含硫化合物類物質(zhì)群液相指紋圖譜的數(shù)學(xué)表達(dá)可有效區(qū)分大蒜和其它蔥屬植物，且數(shù)值分

5、類數(shù)學(xué)模型可以用于大蒜品質(zhì)優(yōu)劣的比較。
　　3.分別以潛在大蒜辣素、蒜氨酸和精氨酸為指標(biāo)成分建立了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中薄層鑒別和含量測定方法；建立水分測定方法，規(guī)定含水量不超過65.0%；規(guī)定以干重計算，蒜氨酸、精氨酸、大蒜辣素含量分別不少于1.5%、1.0%、0.60%。
　　4.大蒜微乳薄層鑒別最佳條件為20%SDS-正丁醇–正己烷（3.0g-17.3ml-3.0ml）-水微乳液展開系統(tǒng)；大蒜二維薄層鑒別以有機展開劑-微乳展開劑展

6、開方式，各成分得到有效分離。
　　結(jié)論：
　　1.針對大蒜富含硫化物物質(zhì)成分及具有特殊酶體系的特點，根據(jù)國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，將酶滅活的氨基酸系統(tǒng)和酶激活的含硫化合物系統(tǒng)作為研究的活性物質(zhì)群是合理的。建立的薄層和液相色譜條件可以分離大蒜中的氨基酸類物質(zhì)和含硫化合物類物質(zhì)，指紋圖譜的建立和方法學(xué)驗證符合指導(dǎo)原則。
　　2.采用常用的幾種數(shù)學(xué)模式對指紋圖譜共有信息進行提取和表達(dá)，發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地大蒜的氨基酸類物質(zhì)群有高度相似性，且與

7、同屬植物也有一定相似性，但采用氨基酸類物質(zhì)群的指紋特征不足以對大蒜進行區(qū)分。
　　3.特征性蒜酶參與反應(yīng)后產(chǎn)生的含硫化合物指紋圖譜可以有效區(qū)分大蒜與其它蔥屬植物，甚至可以區(qū)分不同產(chǎn)地的大蒜，并可用于品質(zhì)優(yōu)劣的評價，有效區(qū)分大蒜與其它種植物應(yīng)采用大蒜酶激活系統(tǒng)中含硫化合物的HPLC指紋特征。
　　4.若要對氨基酸類物質(zhì)群指紋圖譜進行有效區(qū)分，應(yīng)該提取指紋圖譜中的差異特征信息，采用適當(dāng)?shù)臄?shù)學(xué)模型或建立可行的數(shù)學(xué)模型對差異性信息進