大觀霉素分析檢測(cè)方法的比較與壯觀鏈霉菌原生質(zhì)體的制備.pdf

1、大觀霉素是一種氨基糖苷類廣譜抗生素，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌及革蘭氏陰性菌均有抗菌作用，應(yīng)用前景廣闊。因此，對(duì)大觀霉素進(jìn)行菌種選育以提高其產(chǎn)量具有重要的社會(huì)及經(jīng)濟(jì)價(jià)值。 本文以試驗(yàn)室篩選的一株高產(chǎn)大觀霉素的壯觀鏈霉菌為研究菌株，研究了菌體培養(yǎng)時(shí)間、酶濃度、酶解時(shí)間、酶解溫度、預(yù)處理方式等對(duì)壯觀鏈霉菌原生質(zhì)形成和再生的影響，確立壯觀鏈霉菌原生質(zhì)體形成與再生的最佳條件為：在S培養(yǎng)基中加入0.5％的甘氨酸，以30℃，220 /min-恒溫振蕩培

2、養(yǎng)36h(二級(jí)培養(yǎng))的菌絲體為材料，用0.3mol/L的蔗糖作為酶處理前的菌體洗滌液，溶菌酶濃度為2mg/mL，37℃酶解120min；分析比較了HPLC、GC、管碟法、微生物比濁法的優(yōu)缺點(diǎn)，確定并建立了一種快速、高效、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法．微生物比濁法，用于大觀霉素發(fā)酵液的檢測(cè)；以NCBI核酸數(shù)據(jù)庫(kù)中的spcS2基因序列為模板，運(yùn)用primer premier 5.0軟件設(shè)計(jì)引物，PCR擴(kuò)增了壯觀鏈霉菌中的谷氨酰胺．氨基環(huán)醇氨基轉(zhuǎn)移酶基因(