紫杉醇PLGA口服納米粒的制備及生物利用度的研究.pdf

1、紫杉醇(Paclitaxel，TAX)是抗腫瘤藥物，在臨床上己得到廣泛應(yīng)用，特別是對(duì)乳腺癌、卵巢癌的治療作用明顯。由于其水溶性差，臨床使用的紫杉醇注射液中的紫杉醇是靠聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)與無水乙醇以1：1的混合液來穩(wěn)定和溶解。但聚氧乙烯蓖麻油可促進(jìn)組胺釋放，常引起嚴(yán)重的過敏反應(yīng)和其他不良反應(yīng)。為了解決上述問題，研究不含Cremophor EL并能提高紫杉醇生物利用度的制劑成為當(dāng)前的熱點(diǎn)。把紫杉醇制備成口服納米給藥系統(tǒng)

2、后，則不僅能減少毒副作用，增加其穩(wěn)定性，而且方便儲(chǔ)存和運(yùn)輸。本文制備了紫杉醇納米粒(TAX-NPs)，優(yōu)化了其處方和制備工藝，并對(duì)其進(jìn)行了體內(nèi)外評(píng)價(jià)。主要內(nèi)容和結(jié)果如下：
　　 1.建立了紫杉醇樣品HPLC測(cè)定方法，并對(duì)其線性范圍、精密度、回收率等進(jìn)行了驗(yàn)證，結(jié)果表明該方法符合分析要求。
　　 以生物可降解聚合物——聚丙交酯乙交酯共聚物(PLGA)為載體，采用乳化-分散法制備了TAX-NPs；以納米粒的粒徑和包封率為評(píng)價(jià)

3、指標(biāo)，考察了處方及其工藝因素對(duì)制劑質(zhì)量的影響；對(duì)TAX-NPs的基本性質(zhì)，體外穩(wěn)定性和釋藥特征進(jìn)行了考察；用差示掃描量熱法(DSC)及X射線粉末衍射(XRD)分析了紫杉醇在納米粒中的存在狀態(tài)，TAX-NPs的平均粒徑為(99±7.6)nm，Zeta電位為(78.3±5.87)mV，包封率和載藥量分別為(56.99±0.29)％和(7.04±0.13)％。凍干TAX-NPs在4℃放置6個(gè)月穩(wěn)定性良好。DSC及XRD表明TAX以分子形態(tài)被有

4、效地包裹在納米粒中。TAX-NPs在兩種不同的pH值PBS釋放介質(zhì)中進(jìn)行體外釋放，以模擬生物體內(nèi)環(huán)境，在pH值越低的條件下，藥物釋放越快，這對(duì)于載藥納米粒在偏酸性的腫瘤環(huán)境下發(fā)揮抗腫瘤作用非常有利。
　　 2.研究Caco-2細(xì)胞對(duì)納米粒的攝取及其影響因素，以評(píng)價(jià)此種納米粒作為口服抗腫瘤藥物載體的可行性。通過包裹疏水性熒光探針香豆素-6(Coumarin-6，Cou-6)標(biāo)記納米粒，采用熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Cou-6的熒光強(qiáng)度，

5、研究粒徑，、孵育時(shí)間，、納米粒濃度，、納米粒的表面性質(zhì)對(duì)Caco-2細(xì)胞攝取納米粒的影響。采用激光共聚焦顯微鏡觀察Caco-2細(xì)胞對(duì)納米粒的攝取。與聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)做乳化劑制備的納米粒相比，雙十二烷基二甲基溴化銨(Didodecyldimethyl ammonium bromide，DMAB)作為乳化劑制備的納米粒顯著增加了Caco-2細(xì)胞對(duì)納米粒的攝取率，細(xì)胞對(duì)粒徑為100 nm左右的納米粒的攝取

6、率最高。結(jié)果證明納米粒可經(jīng)胃腸道給藥吸收入血。
　　 3.利用大鼠在體腸吸收動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，研究了紫杉醇納米粒及其原料藥在腸道的吸收情況，吸收動(dòng)力學(xué)方程分別為：紫杉醇納米粒lnX剩余=lnXo-0.154×t；紫杉醇原料藥：lnX剩余=lnX0-0.0023×t，相關(guān)系數(shù)r分別為0.9460和0.9102。二者的吸收具有顯著性差異(P＜0.05)，紫杉醇納米粒在小腸中的吸收速率常數(shù)明顯大于紫杉醇原料藥。
　　 4.建立了紫杉

7、醇的血藥濃度測(cè)定方法。色譜條件為：色譜柱：Diamonsil C18柱(250mm×4.6 mm，5μm)；流動(dòng)相：乙腈/水(47：53，v/v)；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：227 nm；流速：1.0 ml/min;進(jìn)樣量：20μl。高、中、低濃度回收率分別為91.23％、92.68％、89.38％。日內(nèi)RSD分別為3.81％、3.49％、2.89％，日間RSD分別為5.12％、4.59％、3.48％。最低定量濃度為0.02μg/ml。所