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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
隨著我國(guó)步入老齡化社會(huì),OA發(fā)病率呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢(shì)。目前OA是老年人關(guān)節(jié)疼痛和致殘的主要原因,這直接或間接地威脅著社會(huì)和家庭的和諧與發(fā)展。筆者導(dǎo)師在中醫(yī)藥治療OA過(guò)程中積累了豐富的臨床經(jīng)驗(yàn),為了探討其臨床療效的分子基礎(chǔ),本課題試把中醫(yī)臨證思維與現(xiàn)代分子生物技術(shù)相結(jié)合,以大鼠膝OA模型為載體,以關(guān)節(jié)軟骨和滑膜DDR2和MMP13的表達(dá)改變?yōu)榍腥朦c(diǎn),從宏觀到微觀,深入探討了消骨痛湯改善OA的分子機(jī)制,從一個(gè)側(cè)面充實(shí)
2、了中醫(yī)藥治療OA的理論依據(jù)和科學(xué)內(nèi)涵。
方法:
實(shí)驗(yàn)研究分三部分進(jìn)行。第一部分:采用改良膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射木瓜蛋白酶法制作OA大鼠模型,按Mankin骨關(guān)節(jié)病組織分類(lèi)方法對(duì)軟骨進(jìn)行評(píng)分,并檢測(cè)造模后不同病理階段關(guān)節(jié)軟骨及滑膜中DDR2和MMP13的表達(dá)規(guī)律和分布特點(diǎn),探討DDR2和MMP13與關(guān)節(jié)軟骨破壞之間的關(guān)系;第二部分:將Wistar大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、治療組(消骨痛湯)。免疫組織化學(xué)法測(cè)定各組關(guān)節(jié)
3、軟骨和滑膜中DDR2和MMP13蛋白的表達(dá)及變化;第三部分:用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)各組軟骨細(xì)胞中DDR2mRNA和MMP13mRNA的表達(dá)水平及變化規(guī)律。
結(jié)果:
第一部分:DDR2在各模型組關(guān)節(jié)軟骨及滑膜中的表達(dá)與正常組有明顯不同,并且各組中軟骨表達(dá)高于相應(yīng)滑膜,MMP13表達(dá)呈現(xiàn)出與DDR2相同的特點(diǎn)(P<0.05);第二部分:治療組關(guān)節(jié)軟骨和滑膜中DDR2蛋白的表達(dá)量低于模型組,并且
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