浸潤性乳腺導(dǎo)管癌mtDNA ATPase6突變及表達(dá).pdf

1、背景：線粒體DNA（mitochodrial，mtDNA）是存在于細(xì)胞核外的遺傳物質(zhì)，其存在性是唯一的?，F(xiàn)代科技研究后發(fā)現(xiàn)，mtDNA與多種腫瘤和多種遺傳疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。mtDNA ATPase6是線粒體基因組中編碼復(fù)合體Ⅴ的最大亞基基因，它與mtDNA ATPase8共同編碼ATP合酶的F0部分。由于線粒體基因組編碼的F0對(duì)能量的產(chǎn)生有導(dǎo)向作用，因此研究ATPase6在乳腺癌組織中的突變及表達(dá)對(duì)了解乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展以及腫瘤細(xì)胞的

2、能量供應(yīng)方式有一定的幫助。
　　目的：1）檢測浸潤性乳腺癌mtDNA ATPase6的基因突變情況，尋找特異性突變位點(diǎn)；2）檢測mtDNA ATPase6在浸潤性乳腺癌中轉(zhuǎn)錄水平，探討其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中尤其是在能量供應(yīng)方面的作用。
　　方法：采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）結(jié)合基因測序方法，對(duì)20例浸潤性乳腺癌進(jìn)行mtDNA ATPase6基因的測序；采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR），檢測浸潤性乳腺癌組織20例，癌旁組織

3、20例的mtDNA ATPase6的轉(zhuǎn)錄水平，同時(shí)用細(xì)胞核保守基因β-actin作為定量參考標(biāo)準(zhǔn)，比較mtDNA ATPase6在癌組織及癌旁組織中的表達(dá)。
　　結(jié)果：在20例乳腺癌組織的mtDNA ATPase6基因中共發(fā)現(xiàn)11個(gè)堿基序列變異，其中6個(gè)為遺傳多態(tài)性，5個(gè)堿基變異屬于突變，突變頻率達(dá)到5或5以上的變異位點(diǎn)3個(gè)，即：C8673 T、A8729 G、T8955 C；研究對(duì)象中mtDNA ATPase6的mRNA表達(dá)水平

4、為癌組織ATPase6/β-actin為0.732±0.137，癌旁組織ATPase6/β-actin為0.344±0.125，兩者相比較有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異p=0.005<0.01。結(jié)合臨床病理參數(shù)，發(fā)現(xiàn)ATPase6的轉(zhuǎn)錄水平TNM-Ⅰ期低于TNM-Ⅲ期p<0.005，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：1、浸潤性乳腺癌mtDNA ATPase6存在高突變位點(diǎn)C8673 T、A8729 G、T8955 C，可能在乳腺癌的發(fā)生及發(fā)展中起著重