流動化學(xué)發(fā)光法在臨床檢驗(yàn)及藥物分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、本文綜述部分簡要介紹了化學(xué)發(fā)光分析的基本情況、發(fā)展以及應(yīng)用。流動化學(xué)發(fā)光分析法具有儀器設(shè)備簡單、分析速度快、靈敏度高、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)，越來越受到分析化學(xué)工作者的重視。藥物分析在臨床、藥代動力學(xué)及藥物開發(fā)研究中具有重要的地位，將化學(xué)發(fā)光用于藥物和臨床分析不僅具有理論意義，而且還有重要的實(shí)用價值。本文就藥物鹽酸倍他司汀和鹽酸伊托必利對發(fā)光體系的作用進(jìn)行了研究，對發(fā)光機(jī)理進(jìn)行了探討；基于魯米諾-過氧化氫體系的化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象；以血紅蛋白作為酶催

2、化劑，聯(lián)用流動注射等技術(shù)，建立了測定甘油三酯、膽固醇的流動注射化學(xué)發(fā)光分析法。研究報告包括以下四個部分： 1.實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)鹽酸倍他司汀對魯米諾-高碘酸鉀發(fā)光體系具有后化學(xué)發(fā)光作用，文中對其作用機(jī)理進(jìn)行了探討及快速測定。結(jié)合流動注射技術(shù)，優(yōu)化反應(yīng)條件，建立了測定鹽酸倍他司汀的新方法，該方法簡便、快速、準(zhǔn)確，線性范圍為2.0×10-7～4.0×10-4mol/L(r=0.9975)，檢出限為1.0×10-7mol/L；對4.0×10-5

3、 mol/L的鹽酸倍他司汀進(jìn)行了11次平行測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.9％。并據(jù)此成功用于片劑中鹽酸倍他司汀含量的測定，結(jié)果令人滿意。 2.基于鹽酸伊托必利與重鉻酸鉀在酸性介質(zhì)中發(fā)生氧化還原反應(yīng)，產(chǎn)生的鉻(Ⅲ)能催化魯米諾-H2O2化學(xué)發(fā)光體系的，且發(fā)光強(qiáng)度與鹽酸伊托必利的濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。據(jù)此，結(jié)合流動注射技術(shù)，優(yōu)化反應(yīng)條件，建立了一種高靈敏度的測定鹽酸伊托必利的新方法。該方法的線性范圍為1.0×10-11～1.0×10

4、-9 mol/L(r=0.9923)，檢出限為2.0×10-12 mol/L；對1.65×10-10。mol/L的鹽酸伊托必利進(jìn)行了11次平行測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5％。 3.基于甘油三酯在脂肪酶的催化作用下水解生成甘油，甘油在甘油激酶催化作用下生成甘油-3-磷酸，甘油-3-磷酸在磷酸甘油氧化酶的作用下釋放出過氧化氫，利用血紅蛋白(Hb)模擬酶催化過氧化氫-魯米諾的化學(xué)發(fā)光體系，結(jié)合流動注射技術(shù)，建立了血紅蛋白催化化學(xué)發(fā)光法聯(lián)

5、用流動注射技術(shù)測定人體血清中的甘油三酯的新方法，并將該法用于血清中甘油三酯含量的測定，測定結(jié)果令人滿意。該法線性范圍為2.26×10-4～2.26×10-6 mol/L(r=0.9955)，檢出限為7.5×10-7mol/L。 4.利用溶膠凝膠固定化酶技術(shù)分別固定了膽固醇脂酶和膽固醇氧化酶，并制成固定化酶柱；膽固醇脂在膽固醇脂酶的催化作用下生成膽固醇，膽固醇在膽固醇氧化酶的催化作用下釋放出的過氧化氫在血紅蛋白的催化作用下，與發(fā)光

6、試劑魯米諾反應(yīng)，產(chǎn)生較強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光，并結(jié)流動注射技術(shù)。由此建立了固定化酶-酶促反應(yīng)偶合化學(xué)發(fā)光聯(lián)用流動注射技術(shù)測定膽固醇的新方法。本文對其標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其濃度與發(fā)光值在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，總膽固醇的線性范圍為2.02×10-4～1.01×10-6 mol/L(r=0.9975)，檢出限為3.5×10-7 mol/L；游離膽固醇的線性范圍為2.18×10-5～5.0×10-8 mol/L(r=0.9991)，檢出限為5.0