DC聯(lián)合CIK治療NSCLC的基礎(chǔ)和臨床研究.pdf

1、目的：建立適用于臨床治療的規(guī)范的樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcell，DC)聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokineinducedkiller,CIK)免疫治療體系，為形成新的非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)個(gè)體化綜合治療模式奠定基礎(chǔ)；比較DC聯(lián)合CIK結(jié)合化療組與常規(guī)化療對(duì)照組的治療效果，從而客觀全面地評(píng)價(jià)DC聯(lián)合CIK治療肺癌的臨床有效率，為DC聯(lián)合CIK的推廣應(yīng)用和科學(xué)評(píng)價(jià)提供有價(jià)值的資料。 方法： 1.采集了20

2、例NSCLC患者外周血單個(gè)核細(xì)胞加入各種細(xì)胞因子體外培養(yǎng)DC及CIK，DC培養(yǎng)至第7天時(shí)加入培養(yǎng)的CIK，LDH方法檢測(cè)CIK細(xì)胞的殺傷活性，ELISA及ELISPOT方法檢測(cè)CIK分泌細(xì)胞因子水平，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC與CIK共同培養(yǎng)后CIK的表型。 2.臨床研究采用DC聯(lián)合CIK與常規(guī)化療間隔進(jìn)行的方案，選擇了120例NSCLC患者進(jìn)行研究，包括50例術(shù)后患者和70例晚期患者。分別對(duì)術(shù)后生物治療組和晚期生物治療組患者進(jìn)行生存分

3、析，通過(guò)影像學(xué)檢查、生化檢查，觀察生物治療患者臨床療效變化，依據(jù)卡氏評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)患者生活質(zhì)量改善狀況。 3.設(shè)立常規(guī)化療對(duì)照組，選擇術(shù)后生物治療+化療組、常規(guī)化療組同期配對(duì)患者各42例，晚期生物治療+化療組、常規(guī)化療組同期配對(duì)患者各61例，比較生物治療+化療組與常規(guī)化療對(duì)照組的無(wú)病生存率及總生存率。 4.應(yīng)用細(xì)胞因子抗體芯片技術(shù)檢測(cè)10例NSCLC患者生物治療前后外周血細(xì)胞因子，比較生物治療前后細(xì)胞因子的表達(dá)水平，同時(shí)，

4、觀察臨床療效與細(xì)胞因子變化的關(guān)系；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)肺癌患者生物治療前后外周血T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞。 結(jié)果： 1.DC+CIK對(duì)肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、乳腺癌細(xì)胞系MCF-7、結(jié)腸癌細(xì)胞系HCT-8和淋巴瘤細(xì)胞系Raji的殺傷活性均高于單純CIK組(P<0.05)；經(jīng)DC誘導(dǎo)后CIK細(xì)胞TGF-β和IL-10分泌水平均低于單純CIK組(P<0.05)，同時(shí)，DC+CIK組IFN-γ分泌水平高于單純CIK組(P<0.05)；DC+

5、CIK中CD4+CD25+Tregs的數(shù)量較單純CIK組明顯降低(P<0.05)，而CD3+CD56+CIK數(shù)量增加(P<0.05)。 2.生物治療回輸后除個(gè)別患者出現(xiàn)低熱外，未觀察到患者出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)。術(shù)后生物治療組患者2年無(wú)病生存率為77.8±6.3％，總生存率為93.2±3.9％，生物治療>4次較≤4次患者的2年無(wú)病生存及總生存率顯著提高(P<0.05)，分別為82.9±7.9％vs56.0±12.1％，100％vs83

6、.5±8.9％； 3.晚期生物治療組患者預(yù)期1，2，3年生存率分別為59.6±5.9％，29.6±6.1％，21.8±6.0％，生物治療≥33次較<3次患者的2年生存率顯著提高47.1±9.8％vs15.4±6.5％(P<0.05)。 4.術(shù)后生物治療組較晚期生物治療組患者生活質(zhì)量有所提高77.8％vs68％。 5.術(shù)后患者生物治療組較常規(guī)化療對(duì)照組2年總生存率顯著提高94.7±3.6％vs78.8±7.0％(P

7、<0.05)，無(wú)病生存率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；晚期患者生物治療組較常規(guī)化療對(duì)照組2年生存率顯著提高27.0±6.3％vs10.1±4.6％(P<0.05)。 6.生物治療后10例NSCLC患者血清中IL-2，IL-5，IL-6，MCP-2，MCP-3水平升高，而TGF-β，IL-1α，IL-8和MCP-1等細(xì)胞因子降低或無(wú)變化，生物治療后未見(jiàn)復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移的患者治療后血清中IFN-γ，G-CSF，GRO，GRO-a，IL-10，IL-13，