苯與甲醛對雄性小鼠生殖毒性的研究.pdf

1、目的:
　　觀察苯與甲醛對雄性小鼠生殖系統(tǒng)的聯(lián)合毒作用,探討二者聯(lián)合作用類型和相關(guān)毒作用機(jī)制,為進(jìn)一步全面評價苯和甲醛的雄性生殖毒性提供實驗及理論依據(jù)。
　　方法:
　　昆明種雄性小鼠108只,按3×3析因設(shè)計隨機(jī)分為9個染毒組,每組12只,甲醛染毒劑量為(0、5、20 mg/kg)、苯染毒劑量為(0、100、400mg/kg);甲醛用生理鹽水稀釋,苯用植物油稀釋,連續(xù)灌胃染毒5天后,再飼養(yǎng)35天處死動物,觀察染毒和飼

2、養(yǎng)期間小鼠的生長發(fā)育、體重增長情況,計算睪丸臟器系數(shù);取出附睪觀察精子死亡率和畸形率;每組6只鼠睪丸做常規(guī)病理學(xué)切片、HE染色,觀察睪丸的形態(tài)結(jié)構(gòu)學(xué)變化;另6只鼠睪丸勻漿離心,取上清液用分光光度法檢測一氧化氮(Nitrogen monoxidum;NO)和鈣(Calcium;Ca2+)含量、總抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity;T-AOC)、Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。
　

3、　結(jié)果:
　　1.染毒期間各組小鼠的毛發(fā)均無光澤,活動減少,進(jìn)食差,在高劑量聯(lián)合組約50％小鼠有排稀便現(xiàn)象;在飼養(yǎng)期間對照組的毛發(fā)光澤、活動和食欲在5天內(nèi)就完全恢復(fù)正常,而各染毒組恢復(fù)緩慢,尤其是高劑量組和聯(lián)合染毒組在處死前仍未見恢復(fù)。
　　2.飼養(yǎng)期間各染毒組小鼠體重比對照組增長緩慢,與對照組比較差異有顯著性(P<0.01),染毒劑量越高,體重增長抑制越明顯;小鼠睪丸臟器系數(shù)隨染毒劑量增加而降低,低苯組與對照組無差異(P>

4、0.05),其他各組與對照組比較差異有顯著性(P<0.01),并存在一定的量-效關(guān)系。苯和甲醛對小鼠體重增長抑制呈相加效應(yīng)(P>0.05),對小鼠睪丸臟器系數(shù)的影響表現(xiàn)為有協(xié)同效應(yīng)(P<0.01)。
　　3.對照組和各染毒組均有死精子和精子畸形現(xiàn)象,對照組精子死亡率和畸形率分別為45.17?、58.33?,染毒組精子的死亡率和畸形率高于對照組(P<0.01),苯與甲醛染毒劑量越高,精子的死亡率和畸形率越高;死精子細(xì)胞膜不完整,HE

5、染色有紅染;精子畸形表現(xiàn)主要有:大頭精子、小頭精子、香蕉頭精子、勾形頭精子、雙頭精子、短尾精子、折尾精子等;甲醛和苯對小鼠精子的損害表現(xiàn)為協(xié)同效應(yīng)。
　　4.睪丸病理組織學(xué)觀察顯示:對照組曲細(xì)精管形態(tài)規(guī)則,邊緣完整,曲細(xì)精管管壁內(nèi)精原母細(xì)胞、初級精母細(xì)胞和次級精母細(xì)胞由外至內(nèi)排列緊密,層次分明清晰,曲細(xì)精管管腔位于中央處,管腔內(nèi)可見大量初步發(fā)育成熟的精細(xì)胞,無變性損害。單毒物和毒物聯(lián)合染毒組可見曲細(xì)精管形態(tài)不規(guī)則,邊緣極不完整,大

6、小不一,曲細(xì)精管管壁內(nèi)的細(xì)胞由外至內(nèi)排列不緊密,精原母細(xì)胞、初級精母細(xì)胞和次級精母細(xì)胞有些變性損害,甚至有細(xì)胞缺失的現(xiàn)象,層次不清晰,曲細(xì)精管管腔偏位,甚至沒有管腔,部分管腔內(nèi)隱約可見少量發(fā)育成熟的精子,有些管腔內(nèi)未見成熟精子。染毒濃度越高,病理損害越明顯。
　　5.T-AOC在各染毒組隨染毒劑量增加而減低,與對照組比較差異均有高度統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),并呈現(xiàn)明顯的量-效關(guān)系。甲醛與苯對小鼠睪丸T-AOC的抑制作用表現(xiàn)為協(xié)同

7、效應(yīng)。
　　6.各組小鼠接觸不同劑量的甲醛和苯后,睪丸中Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性隨染毒劑量增加而降低,與對照組比較差異有顯著性(P<0.01);苯和甲醛之間有交互作用,對Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATPase的抑制作用表現(xiàn)協(xié)同作用。
　　7.各染毒組小鼠睪丸細(xì)胞的NO和Ca2+含量隨染毒劑量的增加而增高,與對照組比較差異有顯著性(P<0.01);苯與甲醛對小鼠睪丸細(xì)胞 NO和Ca