MDS、AA和AL患者骨髓細(xì)胞周期及增殖特征的研究.pdf

1、目的：檢測(cè)骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndrome,MDS)、再生障礙性貧血(aplastic anemia,AA)和急性白血病(acute leukemia,AL)患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞(bone marrow mononuclear cells,BMMNC)的細(xì)胞周期分布及CD34、Ki67抗原的表達(dá)。
　　 方法：選取2009年6月至2010年6月在山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院就診的住院及門診患者68例,M

2、DS組30例,其中難治性貧血(refractory anemia,RA)組18例,難治性貧血伴原始細(xì)胞增多(refractory anemia with excess of blasts,RAEB)組12例;從組22例,其中急性重型再障組7例,慢性非重型再障組15例;AL組16例,其中急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)組12例,急性淋巴細(xì)胞白血病(acute lymphoblastic leukemi

3、a,ALL)組4例。另外選取正常對(duì)照組18例(均為非血液病患者)。采用常規(guī)骨髓穿刺術(shù),抽取骨髓各2 ml;應(yīng)用流式細(xì)胞儀(flow cytometry,FCM),通過(guò)碘化丙啶(propidium iodide,PI)細(xì)胞核染色及免疫熒光雙標(biāo)法,對(duì)其BMMNC的細(xì)胞周期分布及CD34、Ki67的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。
　　 結(jié)果：
　　 1.MDS和AL患者與正常對(duì)照組患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中細(xì)胞周期分布及增殖特征表達(dá)的比較與正常對(duì)照

4、組相比,MDS組和AL組患者其BMMNC中細(xì)胞周期G0/G1期、造血干/祖細(xì)胞(haemopoietic stem cell,HSC)CD34+細(xì)胞、Ki67+細(xì)胞、CD34+Ki67+細(xì)胞、CD34+細(xì)胞中Ki67+細(xì)胞和Ki67+細(xì)胞中CD34+細(xì)胞各自的比例均顯著升高(P＜0.01),而細(xì)胞周期S和S+G2/M期細(xì)胞比例均顯著降低(P＜0.01);AL組細(xì)胞周期G2/M期細(xì)胞比例相比正常組亦顯著降低(P＜0.01)。
　　

5、 2.RA、RAEB和AL患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中細(xì)胞周期分布及增殖特征表達(dá)的比較與RA組相比,RAEB組BMMNC中G0/G1期、CD34+細(xì)胞、Ki67+細(xì)胞、CD34+Ki67+細(xì)胞、CD34+細(xì)胞中Ki67+細(xì)胞和Ki67+細(xì)胞中CD34+細(xì)胞比例均顯著升高(P＜0.05),而S、S+G2/M期細(xì)胞比例均顯著降低(P＜0.05);與RAEB組相比,AL組BMMNC中G0/G1期、CD34+細(xì)胞、Ki67+細(xì)胞、CD34+Ki67+細(xì)

6、胞、CD34+細(xì)胞中Ki67+細(xì)胞和Ki67+細(xì)胞中CD34+細(xì)胞比例均顯著升高(P＜0.01);而S、S+G2/M期細(xì)胞比例均顯著降低(P＜0.01)。
　　 3.AA患者和正常對(duì)照組患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中細(xì)胞周期分布及增殖特征表達(dá)的比較與正常對(duì)照組相比,AA組BMMNC中G0/G1期、S期、G2/M期和S+G2/M期細(xì)胞比例的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),而CD34+細(xì)胞中Ki67+細(xì)胞比例顯著降低(P＜0.05),且C

7、D34+細(xì)胞、CD34+Ki67+細(xì)胞和Ki67+細(xì)胞中CD34+細(xì)胞比例均顯著降低(P＜0.01).
　　 4.AA患者和RA患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中細(xì)胞周期分布及增殖特征表達(dá)的比較與AA組相比,RA組BMMNC中G0/G1期、CD34+細(xì)胞、Ki67+細(xì)胞、CD34+Ki67+細(xì)胞、CD34+細(xì)胞中Ki67+細(xì)胞和Ki67+細(xì)胞中CD34+細(xì)胞比例均顯著升高(P＜0.01),而RA組的S和S+G2/M期細(xì)胞比例均顯著降低(P＜0

8、.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.MDS患者骨髓細(xì)胞G1期阻滯且伴有造血干/祖細(xì)胞的高增殖特性,可解釋MDS患者骨髓細(xì)胞分化成熟障礙,在細(xì)胞形態(tài)學(xué)上可表現(xiàn)為病態(tài)造血,在臨床上可表現(xiàn)為骨髓增生活躍而外周血細(xì)胞減少,支持MDS的本質(zhì)是造血于/祖細(xì)胞的惡性克隆性疾病。
　　 2.MDS與AL患者骨髓細(xì)胞存在G1期阻滯的同時(shí),都伴有造血干/祖細(xì)胞的高增殖特性。由RA進(jìn)展到RAEB,再由RAEB進(jìn)展到AL,BMMNC中C

9、D34+細(xì)胞、CD34+細(xì)胞中Ki67+細(xì)胞比例均升高,G0/G1期細(xì)胞比例、Ki67+細(xì)胞比例亦升高,提示來(lái)源于造血干/祖細(xì)胞的惡性克隆性擴(kuò)增逐漸獲得優(yōu)勢(shì)而積聚,和/或其細(xì)胞本身質(zhì)的缺陷越來(lái)越嚴(yán)重;MDS的不同發(fā)展階段及其最終轉(zhuǎn)化為急性白血病,從細(xì)胞周期理論及其增殖特征分析,它們之間并無(wú)質(zhì)的差異,可能是同一疾病的不同發(fā)展階段,支持MDS和AL具有相似的發(fā)病機(jī)制。
　　 3.與正常對(duì)照組相比,AA患者骨髓細(xì)胞的細(xì)胞周期分布差異無(wú)