尼可地爾、美托洛爾、谷氨酰胺單獨(dú)及聯(lián)合使用抗大鼠心肌缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：研究尼可地爾(Nicorandil，Nic)、谷氨酰胺(glutamine，Glu)、美托洛爾(metoprolol，Met)三藥聯(lián)用對(duì)大鼠在體心肌缺血/再灌注損傷(myocardialischemia/reperfusioninjury，MIRI)的保護(hù)作用及其機(jī)制。
　　方法：將雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為7組，即(1)假手術(shù)(sham)組；(2)缺血再灌注損傷(IR)組；(3)尼可地爾(Nic)組；(4)谷氨酰胺(Gl

2、u)組；(5)美托洛爾(Met)組；(6)尼可地爾、谷氨酰胺、美托洛爾聯(lián)合用藥高劑量(NGM)組；(7)尼可地爾、美托洛爾、谷氨酰胺聯(lián)合用藥低劑量(NGML)組。sham組只開胸，行冠狀動(dòng)脈左前降支(leftanteriordescending，LAD)穿線；IR組行心臟LAD30min缺血/120min再灌注程序(ischemia/reperfusion，I/R)；藥物預(yù)處理組則在I/R程序前30min腹腔注射相應(yīng)藥物，Nic、Glu

3、、Met的初始給藥劑量為1mg/kg，134.6mg/kg，1mg/kg。監(jiān)測各組心肌缺血再灌注損傷期間的心臟生理學(xué)情況；損傷后心肌梗死面積和形態(tài)學(xué)改變；于120min再灌注末取血測定肌酸激酶MB同工酶(creatinekinase-MB，CK-MB)、髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)活性和丙二醛(malonaldehyde，MDA)含量；TUNEL

4、(terminaldexynucleotidyltransferase-mediateddUIPnickendlabeling)法檢測心肌細(xì)胞凋亡率，Western印跡法檢測凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2/Bax和保護(hù)性蛋白熱休克蛋白70(heatshockprotein70，HSP70)的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.藥物預(yù)處理對(duì)大鼠I/R損傷后心臟生理學(xué)的影響
　　與IR組比較，Met、NGM和NGML組可顯著推遲室性早

5、搏(ventricularprematurecontractions，VPC)出現(xiàn)時(shí)間(P<0.05)，縮短累計(jì)時(shí)間(P<0.01)，Glu組雖未推遲VPC出現(xiàn)時(shí)間，但明顯縮短累計(jì)時(shí)間(P<0.01)；各實(shí)驗(yàn)組室速(ventriculartachycardia，VT)出現(xiàn)時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別，除Nic組外其余預(yù)處理組VT累計(jì)時(shí)間均小于IR組(P<0.01)。與藥物單用組比較，NGM和NGML組，VT累計(jì)時(shí)間縮短(P<0.05)；與IR組VP

6、C100％的發(fā)生率相比，Glu組、NGM組和NGML組的VPC發(fā)生率較IR組降低(P<0.05)。與IR組相比，除Nic組外，其余組VT發(fā)生率低于IR組(P<0.01)。室顫(ventricularfibrillation，VF)僅發(fā)生在IR組和Nic組，且后者略高于前者。
　　2.藥物預(yù)處理對(duì)大鼠I/R損傷后心肌梗死面積和形態(tài)學(xué)的影響
　　IR組心肌梗死面積(infarctionsize，IS)大(93.5±24.1mg)

7、，梗死區(qū)與危險(xiǎn)區(qū)(areaatrisk，AAR)比值(IS/AAR)高(53.4±13.6%)，蘇木精-伊紅(Haematoxylin-Eosine，HE)染色見病變明顯。與IR組比較，各藥物預(yù)處理組梗死面積均顯著減小(P<0.01)，IS/AAR值明顯降低(P<0.01)，HE染色見病變減輕。與藥物單用組比較，NGM組可進(jìn)一步降低IS/AAR，改善形態(tài)變化。
　　3.藥物預(yù)處理對(duì)大鼠I/R損傷后的血液酶學(xué)的影響
　　IR組

8、血漿CK-MB活性明顯升高，為sham組的2.11倍(P<0.01)。藥物預(yù)處理組CK-MB活性降低(P<0.01vsIR)。與Glu、Met和NGML組相比，NGM組的CK-MB活性更低(P<0.05)。IR組血漿MPO活性明顯升高，為sham組的1.67倍(P<0.01)。藥物預(yù)處理組MPO活性降低(P<0.01vsIR)。與藥物單用組相比，NGM組的MPO活性更低(P<0.05)。
　　IR組血漿SOD活性較低(207.8±

9、32.4U/ml)，為sham組的0.94倍，藥物預(yù)處理組SOD活性升高(P<0.01vsIR)。與藥物單用組相比，NGM組的SOD活性更高(P<0.05)。IR組血漿MDA含量較高(8.15±1.32nmol/ml)，為sham組的1.72倍，藥物預(yù)處理組MDA含量均降低(P<0.01vsIR)。
　　4.藥物預(yù)處理對(duì)大鼠I/R損傷后的抗凋亡能力的影響
　　IR組在缺血區(qū)有較高的細(xì)胞凋亡率(36.9±10.3%)，凋亡相關(guān)

10、蛋白表達(dá)Bcl-2/Bax值較低(0.14±0.08)；和I/R組比較，藥物預(yù)處理組的細(xì)胞凋亡率降低(P<0.01)，Bcl-2/Bax值升高(P<0.01)。
　　5.藥物預(yù)處理對(duì)大鼠I/R損傷后HSP70表達(dá)的影響
　　與sham組比較，IR組的HSP70表達(dá)明顯增多(P<0.01)：與IR組相比，藥物預(yù)處理組的HSP70表達(dá)明顯升高(P<0.01)；與藥物單用組相比，NGM組的HSP70表達(dá)更高(P<0.01)。