公丁香和母丁香化學(xué)成分的高速逆流色譜分析.pdf

1、桃金娘科(Myrtaceae)蒲桃屬(Syzygium)植物丁香(Eugenia caryophylla Thunb.)是《中國藥典》2005年版收錄的中草藥,其中公丁香是植物丁香藥用未開放的干燥花蕾,母丁香是植物丁香的成熟果實,丁香油具有良好的抗菌消炎作用。公丁香和母丁香的主要活性成分是植物丁香不同生長時期的次生代謝產(chǎn)物,為闡明公丁香和母丁香藥理作用差異的物質(zhì)基礎(chǔ),本文利用高速逆流色譜法分析比較公丁香和母丁香非揮發(fā)油成分的同時,并利用

2、高速逆流色譜和高效液相色譜技術(shù)對母丁香的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究。
　　 本論文由三部分組成,主要包括以下幾方面的研究內(nèi)容:
　　 首先,綜述了公丁香和母丁香化學(xué)成分、藥理作用、分離提取方法的研究進展以及高速逆流色譜的應(yīng)用現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢。
　　 其次,將公丁香和母丁香95％乙醇回流提取液經(jīng)逐級萃取、大孔吸附樹脂進一步凈化,得到公丁香和母丁香的粗提物。利用高速逆流色譜法分離公丁香與母丁香粗提物,并對其主要化學(xué)成分進行

3、比較分析。采用溶劑體系正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5:8:6:13,v／v／v／v)和(5:8:9:10,v／v／v／v)分布洗脫,公丁香和母丁香以主機轉(zhuǎn)速880 r／min,流速1.2 mL／min,單次進樣量70 mg各分離得到9個洗脫組分,兩張高速逆流色譜分離圖譜的重疊率為66.67％,其中包含6個共有峰,并且各共有峰HSCCC保留時間的相對標準偏差RSD的平均值為2.260％,與國家標準關(guān)于方法學(xué)考察資料技術(shù)參數(shù)對RSD≤3％的

4、要求相符合,可以判定公丁香和母丁香化學(xué)成分內(nèi)在質(zhì)量即存在穩(wěn)定性和均一性,也具有差異性,說明高速逆流色譜法比較公丁香和母丁香化學(xué)成分的可行性,為構(gòu)建公丁香和母丁香高速逆流色譜指紋圖譜奠定基礎(chǔ)。同時本實驗以上述條件成功地從公丁香和母丁香粗提物中分離得到槲皮素、鞣花酸、5,7-二甲氧基-2-甲基色原酮、5,7-二甲氧基-2,6-二甲基色原酮、3,5,3’4’-四羥基-7-甲氧基黃酮五種非揮發(fā)油成分,通過標準品對照以及1H-NMR、13C-NM

5、R、MS等波譜方法對各化合物的結(jié)構(gòu)進行鑒定。其中化合物5,7-二甲氧基-2,6-二甲基色原酮的結(jié)構(gòu)是首次通過核磁數(shù)據(jù)進行表征。
　　 最后,在第二部分實驗的基礎(chǔ)上,利用高效液相色譜技術(shù)分離純化母丁香強極性和弱極性粗提物,得到?jīng)]食子酸、5,7,3',4',5'-五甲氧基黃酮、5-甲基花椒油素三種高純度化合物,通過標準品對照以及1H-NMR、13C-NMR、MS等波譜方法對各化合物的結(jié)構(gòu)進行鑒定。其中化合物5,7,3’,4’,5’-