甲鈷胺對(duì)周圍神經(jīng)損傷后運(yùn)動(dòng)終板再生修復(fù)的影響.pdf

1、周圍神經(jīng)損傷后骨骼肌功能的恢復(fù)一直是神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的一大熱點(diǎn)問(wèn)題。骨骼肌是周圍神經(jīng)系統(tǒng)的靶器官，骨骼肌正常功能的維持有賴于神經(jīng)的支配和調(diào)節(jié)。周圍神經(jīng)損傷后，骨骼肌如果不能及時(shí)獲得神經(jīng)再支配，將發(fā)生不可逆的萎縮甚至功能喪失。軀體運(yùn)動(dòng)神經(jīng)末梢，形態(tài)學(xué)常稱運(yùn)動(dòng)終板(motor end plat,MEP)，生理學(xué)又稱神經(jīng)肌肉接頭(neuromuscular junction,NMJ)是存在于骨骼肌和神經(jīng)纖維之間的特化區(qū)域。神經(jīng)功能的再生和修復(fù)最終

2、要靠運(yùn)動(dòng)終板的再生與重建，終板的功能狀態(tài)反映肌肉的功能狀態(tài)。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外做了大量關(guān)于周圍神經(jīng)損傷的研究，雖然取得了進(jìn)步，但神經(jīng)功能的恢復(fù)仍不能令人滿意。有研究發(fā)現(xiàn)：甲鈷胺能促進(jìn)髓鞘的主要成分——卵磷脂的合成，并且能參與神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿(acetylcholine,ACh)合成，促進(jìn)軸漿轉(zhuǎn)運(yùn)和軸突再生，在治療周圍神經(jīng)病變特別是糖尿病方面的療效已得到了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床的證實(shí)，但其對(duì)神經(jīng)損傷后骨骼肌及其運(yùn)動(dòng)終板再生恢復(fù)作用及其機(jī)制報(bào)道較少，特

3、別是甲鈷胺對(duì)神經(jīng)損傷后運(yùn)動(dòng)終板乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase,AChE)、乙酰膽堿受體(acetylcholinereceptor,AChR)的變化報(bào)導(dǎo)較少。因此，本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型，局部注射甲鈷胺，觀察不同時(shí)間神經(jīng)電生理、肌肉濕重、運(yùn)動(dòng)終板形態(tài)、乙酰膽堿酯酶、乙酰膽堿受體的變化，探討甲鈷胺對(duì)神經(jīng)損傷后運(yùn)動(dòng)終板恢復(fù)的促進(jìn)作用，并為臨床神經(jīng)疾患的治療提供理論依據(jù)。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)選取成年雄性w

4、istar大鼠(250-300g)90只，隨機(jī)分成A組(甲鈷胺組)、B(生理鹽水對(duì)照組)兩組，每組45只。通過(guò)鉗夾大鼠坐骨神經(jīng)制備神經(jīng)損傷模型，術(shù)后約2-3小時(shí)動(dòng)物意識(shí)恢復(fù)，局部注射藥物。A組每日注射甲鈷胺400μl/kg，B組每日注射等量生理鹽水。術(shù)后1、4、8周分別隨機(jī)取A、B組大鼠各15只，測(cè)定其神經(jīng)傳導(dǎo)速度來(lái)評(píng)價(jià)神經(jīng)功能，然后完整解剖分離腓腸肌用天平稱其濕重。取肌組織分別行氯化金染色，光鏡下觀察運(yùn)動(dòng)終板的變化；AChE酶組織化學(xué)

5、染色觀察AChE的含量變化，并結(jié)合圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行光密度測(cè)定；AChR熒光染色，觀察乙酰膽堿受體變化；所有數(shù)據(jù)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：1，術(shù)后1周所有大鼠損傷側(cè)足部潰瘍，站立困難。神經(jīng)傳導(dǎo)速度降低，兩組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。兩組腓腸肌濕重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。兩組鏡下運(yùn)動(dòng)終板均出現(xiàn)退變，軸突終末分枝減少。AChE染色：AChE含量減少，兩組光密度分析無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。兩組乙酰膽堿受體形態(tài)不完整

6、，皺褶減少。2，術(shù)后4周A組大鼠較B組好轉(zhuǎn)明顯，B組，走路步態(tài)不協(xié)調(diào)。A組較B組神經(jīng)傳導(dǎo)速度有所恢復(fù)，兩組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。腓腸肌濕重兩組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。A組運(yùn)動(dòng)終板數(shù)量增加，染色較深，形態(tài)不規(guī)則。B組運(yùn)動(dòng)終板數(shù)量增加不明顯，染色較淡，形態(tài)多呈不規(guī)則狀。AChE染色：兩組AChE的陽(yáng)性區(qū)光密度分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩組乙酰膽堿受體數(shù)量增加A組形態(tài)趨于完整，B組形態(tài)仍不規(guī)則。3，術(shù)后8周A組大

7、鼠傷口已愈合，步態(tài)協(xié)調(diào)。B組走路仍有歪斜。神經(jīng)傳導(dǎo)速度A組較B組明顯恢復(fù)，兩組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。A組與B組腓腸肌濕重統(tǒng)計(jì)學(xué)有明顯差異(P＜0.01)。A組運(yùn)動(dòng)終板形態(tài)與著色接近正常，B組沒(méi)有明顯變化。AChE染色：A組AChE活性明顯高于B組，兩組陽(yáng)性區(qū)光密度分析有顯著差異(P＜0.01)。A組乙酰膽堿受體形態(tài)漸趨成熟，B組仍不規(guī)則。
　　 結(jié)論：
　　 1，甲鈷胺能延緩周圍神經(jīng)損傷后運(yùn)動(dòng)終板的退變、促進(jìn)