天麻對(duì)大鼠腦缺血保護(hù)作用的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文主要從以下幾方面進(jìn)行了論述：
　　第一部分 天麻對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:探討天麻對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠保護(hù)作用及機(jī)制，為臨床治療缺血性腦血管病提供更客觀的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:采用線栓法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，分為尼莫地平組、模型組、天麻低劑量組、天麻中劑量組、天麻高劑量組、假手術(shù)組，選擇七項(xiàng)觀察指標(biāo)，包括神經(jīng)功能缺失體征評(píng)分、腦含水量、CV染色、光鏡、電鏡、TTC染色、TU

2、NEL法分別觀察天麻對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能、腦水腫、腦梗死體積和細(xì)胞凋亡等的影響。
　　結(jié)果:(1)天麻各劑量組神經(jīng)功能缺損明顯減輕，與CIR組相比均有顯著性差異。(2)腦含水量、CV染色觀察，天麻各劑量組能夠減輕腦水腫和腦水腫引起的缺血半球腫脹率，各時(shí)間點(diǎn)與CIR組相比有顯著性差異。(3)光鏡與電鏡的觀察，表明天麻各劑量組可明顯改善缺血再灌注對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損傷，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞起到保護(hù)作用。(4) TTC染色觀察，腦缺血1h再

3、灌注24h，天麻各劑量組腦梗死體積明顯縮少，與CIR組相比均有顯著性差異。(5) TUNEL法觀察，天麻各劑量組缺血周邊區(qū)凋亡細(xì)胞明顯減少，與CIR組相比均有顯著性差異。 結(jié)論:天麻可明顯減輕缺血再灌注引起的腦水腫、腦梗死體積和細(xì)胞凋亡的程度，從而起到腦保護(hù)作用，為臨床應(yīng)用天麻治療腦缺血提供了理論依據(jù)。
　　第二部分 天麻對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響
　　目的:觀察天麻對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠

4、神經(jīng)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因及蛋白表達(dá)的影響。
　　方法:采用線栓法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，實(shí)驗(yàn)分為六組:將SD大鼠（250-280克雄性）隨機(jī)分為6組，每組6只:假手術(shù)組（不給藥）;模型組給（生理鹽水）;天麻低劑量組（灌胃參考劑量0.35g/kg/d）;天麻中劑量組（灌胃參考劑量0.70g/kg/d）;天麻高劑量組（灌胃參考劑量1.40g/kg/d）（每天灌胃一次）;尼莫地平組（灌胃參考劑量5mg/kg/d）;缺血1小時(shí)，再灌注

5、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí);分別觀察(1)缺血1小時(shí)，再灌注12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí);應(yīng)用rt-PCR檢測各實(shí)驗(yàn)組Bax、bcl-2、Caspase-3、XIAP的mRNA的表達(dá);應(yīng)用免疫組化檢測各實(shí)驗(yàn)組Bax、bcl-2、Caspase-3、XIAP蛋白的表達(dá);應(yīng)用Western blotting法檢測各實(shí)驗(yàn)組Bax、bcl-2、Caspase-3、XIAp蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)RT-PCR檢測

6、CIR后腦組織Bcl-2mRNA、BaxmRNA、Caspase-3mRNA、XIAPmRNA的表達(dá)，隨再灌注時(shí)間的延長，表達(dá)增加，天麻各劑量組各時(shí)間點(diǎn)Bcl-2mRNA、XIAPmRNA表達(dá)均不同程度增強(qiáng)，BaxmRNA、Caspase-3mRNA表達(dá)均不同程度降低。與CIR組相比有顯著性差異。(2)免疫組化檢測CIR后腦組織Caspase-3、XIAP、bcl-2、bax蛋白的表達(dá)，隨再灌注時(shí)間的延長，表達(dá)增加，天麻各劑量組各時(shí)間點(diǎn)

7、Bcl-2、XIAP蛋白表達(dá)均不同程度增強(qiáng)，Bax、Caspase-3蛋白表達(dá)均不同程度降低。與CIR組相比有顯著性差異。(3)Western blotting法檢測CIR后腦組織Caspase-3、XIAP、bcl-2、bax蛋白的表達(dá)，隨再灌注時(shí)間的延長，表達(dá)增加，天麻組各時(shí)間點(diǎn)Bcl-2、XIAP蛋白表達(dá)均不同程度增強(qiáng)，Bax、Caspase-3蛋白表達(dá)均不同程度降低。與CIR組相比有顯著性差異。
　　結(jié)論:天麻抗凋亡機(jī)制可