速激肽人hemokinin-1片段(4-11)對白血病細胞增殖與分化作用的研究及其NK-,1-受體細胞表達模型的建立與應用.pdf

1、人hemokinin-1及其羧基端片段(4-11)是由近來在人類中鑒定的TAC4基因所編碼的哺乳動物速激肽。研究表明速激肽在人體內具有免疫調節(jié)功能，且人hemokinin-1能夠顯著抑制人類急性髓系白血病細胞HL-60的增殖。因此我們研究了人hemokinin-1片段(4-11)對該細胞增殖與分化的影響。結果發(fā)現(xiàn)人hemokinin-1片段(4-11)(1-300μM)能夠抑制HL-60細胞的增殖，并且是劑量依賴的，同時這種抑制作用是伴

2、隨著將細胞周期阻滯于S期。我們還發(fā)現(xiàn)HL-60細胞的NBT還原能力在人hemokinin-1片段(4-11)作用下能夠顯著增強，表明此片段具有誘導該細胞分化的作用。但是速激肽NK1受體拮抗劑SR140333和速激肽NK2受體拮抗劑SR48968卻不能拮抗人hemokinin-1片段(4-11)的作用。所有的結果顯示：人hemokinin-1片段(4-11)不僅能抑制HL-60細胞的增殖，也能誘導其分化，但是卻不是通過經典的速激肽受體發(fā)揮

3、作用的。我們的研究暗示人hemokinin-1片段(4-11)或許可以作為一種免疫調節(jié)因子來參與癌癥治療。
　　 速激肽SP通過NK1受體在一些生理過程包括痛覺傳遞和炎癥中扮演了重要的角色。NK1受體是G蛋白偶聯(lián)受體家族的一員，最近的研究表明SP通過與NK1受體結合，可以激活多種細胞內的應答，包括cAMP的生成、絲裂活化原蛋白激酶(MAPK)的級聯(lián)反應。人hemokinin-1及其片段(4-11)同屬于速激肽家族成員，但并沒有文

4、獻報道兩者對于細胞內信號的影響。因此，我們將NK1受體質粒轉染中國倉鼠卵母細胞(CHO)，并從DNA、RNA及蛋白水平篩選得到穩(wěn)定表達NK1受體的細胞克隆。利用此模型，我們檢測了人hemokinin-1及其片段(4-11)對細胞內cAMP水平和ERK1/2磷酸化的影響。結果表明兩者均可以明顯增加細胞內的cAMP積累，并在一定程度上誘導ERK1/2的磷酸化。本部分只是對速激肽受配體結合對細胞信號通路的影響進行了初步的研究，為以后新型速激肽