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文檔簡介
1、研究背景及目的:FLT3(Fms-like tyrosine kinase-3)屬于Ⅲ型受體酪氨酸激酶(Receptor Tyrosine Kinase,RaX)家族成員,在與其配體FL(FLT3 ligand,F(xiàn)L)結(jié)合后,使酪氨酸殘基磷酸化,并通過各種胞漿蛋白傳導(dǎo)激活信號(hào),提供增值刺激,促進(jìn)白血病惡性克隆的增值與維持。近年來,有許多研究發(fā)現(xiàn)FLT3基因出現(xiàn)內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)(internaltandem duplication,ITD)突
2、變導(dǎo)致近膜結(jié)構(gòu)域(juxtamembrane domain,JM)延長,也稱FLT3長度突變(FLT3 length mutation,F(xiàn)LT3-LM)。發(fā)生突變的FLT3受體在配體非依賴的情況下發(fā)生自動(dòng)磷酸化和組成性激活,引起下游異常的信號(hào)傳導(dǎo),在造血系統(tǒng)惡性疾病的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。 一些AML細(xì)胞共表達(dá)FLT3和FL,兩者可能通過自分泌,旁分泌形式發(fā)生FLT3受體的活化,F(xiàn)LT3的高表達(dá)水平可能通過野生型FLT3正常信
3、號(hào)傳導(dǎo)的強(qiáng)化方式,在白血病發(fā)病中發(fā)揮重要作用。 本試驗(yàn)旨在研究我中心FLT3長度突變(FLT3-LM)在急性髓系白血病(acutemyeloid leukemia,AML)及各亞型中的發(fā)生率,及其與白血病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系,探索FLT3-LM在白血病治療和預(yù)后判斷中的應(yīng)用價(jià)值。另外檢測(cè)FLT3受體在AML患者及其各亞型中單個(gè)核細(xì)胞(mononuclear cells,MNC)的表達(dá)水平,探討其作為AML患者的預(yù)后判斷指標(biāo)意義。
4、 方法:本研究分兩部分。 第一部分:采用基因組DNA聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)檢測(cè)95例初治AML,22例初治急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL),對(duì)照組10例健康人骨髓FLT3基因長度突變(FLT3-LM)發(fā)生率,分析FLT3-LM陽性患者的臨床特征。 第二部分:采用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)其中68例AML患者及其正常對(duì)照組單個(gè)核細(xì)胞(MNC)的FLT3表達(dá)水平,同時(shí)分析FLT3-LM陰性AML患者不同F(xiàn)LT3表達(dá)水平患者
5、的臨床特征,以及FLT3-LM陰性AML患者其與FLT3-LM陽性之間的關(guān)系。 結(jié)果: 1.1 195例AML患者中15例檢測(cè)到FLT3-LM陽性,突變率為15.8%。其中14例M1中3例(21.3%),24例M2中4例(16.6%),18例M3中2例(11.1%),29例M5中5例(17.2%),4例M6中1例檢測(cè)到陽性(25%)。而22例ALL和10例正常對(duì)照中均未檢測(cè)到FLT3-LM陽性。 1.2 FLT3
6、-LM在35例正常染色體核型組和7例伴t(15;17)核型異?;颊咧蟹謩e檢測(cè)到10例和2例,突變率均為28.5%,較43例其他核型組突變率高(P<0.05);FLT3-LM組與非突變組在年齡,性別方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05); FLT3-LM陽性患者外周血白細(xì)胞高,骨髓原始細(xì)胞高(P<0.05)。 1.3 FLT3-LM組與非突變組在誘導(dǎo)緩解率,總生存時(shí)間方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 2.1 68例AML患者中
7、FLT3表達(dá)水平為(11.48±14.87)%,高于正常對(duì)照組水平(1.10±0.31)%(P<0.05);FLT3表達(dá)水平在12例突變組為(5.86±6.85)%,低于56例非突變組(14.14±16.25)%(P<0.05)。 2.2 FLT3表達(dá)水平在11例M1,18例M2,9例M3,6例M4,21例M5中分別為(11.76±10.68)%,(11.17±18.75)%,M3(17.79±21.21)%,M4(15.84±
8、18.82)%,M5(12.50±12.13)%,各亞型中無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。在6例t(15;17)核型組,38例正常核型組與7例復(fù)雜核型組間表達(dá)水平分別為(22.23±23.13)%,(13.00±16.00)%,(7.33±6.95)%,亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 2.3 臨床資料顯示,誘導(dǎo)治療后緩解組的FLT3表達(dá)水平為(5.52±2.67)%,低于非緩解組(25.53±22.60)%(P<0.05)。 結(jié)論:FL
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