涎腺惡性混合瘤E-cadherin蛋白表達(dá)變化及其分子機(jī)制.pdf

1、目的：分析惡性成分組織學(xué)類型為非特異性腺癌（adenocarcinoma, not otherwise specified，ANOS）的涎腺惡性混合瘤（malignant mixed tumor，或稱惡性多形性腺瘤，malignant pleomorphic adenoma, MPA）的臨床病理特點(diǎn)。探討E-cadherin蛋白表達(dá)和E-cadherin基因啟動(dòng)子甲基化（promoter methylation）、基因雜合性缺失（los

2、s of heterozygosity）、基因突變（mutation）之間的相關(guān)性，以及這些檢測指標(biāo)在涎腺混合瘤發(fā)生、惡變中的作用。
　　 方法：回顧性分析惡性成分為非特異性腺癌的65例原發(fā)MPA臨床病理資料，對其中同時(shí)具有顯著的良、惡性腫瘤成分和瘤旁腺體的30例樣本進(jìn)行自身配對研究，應(yīng)用免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）方法檢測E-cadherin蛋白的表達(dá)，應(yīng)用甲基化特異性PCR（methyla

3、tion specific PCR，MSP）方法檢測E-cadherin基因啟動(dòng)子甲基化狀況，應(yīng)用微衛(wèi)星分析(microsatellite analysis)方法檢測MPA中E-cadherin基因（D16S421、D16S515）雜合性缺失情況，應(yīng)用高效液相變性色譜分析（denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC）和DNA測序方法檢測E-cadherin外顯子（Ex

4、on）7、8、9基因突變情況。
　　 結(jié)果：①惡性成分為非特異性腺癌者占全部MPA的56.5％，其組織學(xué)分級與腫瘤侵襲性呈顯著正相關(guān)（p=0.000）；其侵襲性與TNM分期呈顯著正相關(guān)（p=0.007）；其侵襲性、組織學(xué)分級與頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著正相關(guān)（p=0.014，p=0.004）。②瘤旁腺體和MPA良、惡性腫瘤成分中E-cadherin蛋白高表達(dá)的分別占97％（29/30）、77％（23/30）、47％（14/30），E-

5、cadherin基因啟動(dòng)子甲基化率分別為10％（3/30）、37％（11/30）、77％（23/30），在MPA腫瘤的良、惡性成分中E-cadherin基因的啟動(dòng)子甲基化狀況與E-cadherin蛋白表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)性（p=0.001，p=0.029）。③在非/微侵襲性MPA良性成分中，腺上皮細(xì)胞E-cadherin蛋白表達(dá)低于相應(yīng)的瘤旁腺體組織（p=0.009）；E-cadherin基因啟動(dòng)子甲基化的發(fā)生率（45.5％，10/22）高

6、于相應(yīng)的瘤旁腺體組織（9％，2/22）（p=0.016）。④在侵襲性MPA惡性成分中，腺上皮細(xì)胞E-cadherin蛋白表達(dá)低于相應(yīng)的良性成分（p=0.026）；E-cadherin基因啟動(dòng)子甲基化的發(fā)生率（75％，6/8）高于相應(yīng)的良性成分（12.5％，1/8）（p=0.041）。⑤在15例（50％，15/30）MPA中檢測到E-cadherin基因雜合性缺失，其中良、惡性腫瘤成分分別有6例（20％，6/30）和12例（40％，12/