NaCS-PDMDAAC微膠囊固定化粗壯假絲酵母的應(yīng)用.pdf

1、纖維素硫酸鈉(NaCS)-聚二甲基二烯丙基氯化銨(PDMDAAC)體系微膠囊因具備機械強度高、膠囊壁薄、物化性能穩(wěn)定、生物相容性好、制備簡單等優(yōu)點成為細(xì)胞微囊化的一個新研究方向，在生化和醫(yī)藥等領(lǐng)域擁有廣闊的應(yīng)用前景。論文將此體系應(yīng)用于固定假絲酵母C.valida產(chǎn)脂肪酶及不對稱催化苯乙酮。 首先，論文針對假絲酵母C.valida的液態(tài)發(fā)酵，從不同碳源、氮源中選擇出有利于菌的生長及產(chǎn)脂肪酶的碳、氮源，并進(jìn)一步優(yōu)化復(fù)合碳源葡萄糖、橄

2、欖油的適合濃度，獲得最佳的液體培養(yǎng)基組成，還對搖床轉(zhuǎn)速、初始pH值和溫度等外部條件進(jìn)行優(yōu)化，確定適合的發(fā)酵條件，最終脂肪酶產(chǎn)量可達(dá)10.95U/mL。 然后用NaSC-PDMDAAC微膠囊進(jìn)行固定假絲酵母生產(chǎn)脂肪酶，通過不斷更換培養(yǎng)基培養(yǎng)約80h酶活達(dá)到最大值為17.2U/mL，92h膠囊內(nèi)細(xì)胞濃度達(dá)到，比游離培養(yǎng)高出約4倍。并進(jìn)一步用大孔膠囊固定化酵母，由于能夠?qū)⒅久笖U散至膠囊外，實現(xiàn)了酶與菌體的分離，在一定程度上緩解產(chǎn)物抑

3、制，優(yōu)勢更明顯，在固定化培養(yǎng)穩(wěn)定以后，脂肪酶的時空產(chǎn)率要比游離培養(yǎng)高出81％。若以膠囊內(nèi)菌液來計算的話，脂肪酶的時空產(chǎn)率要比游離培養(yǎng)高出7.5倍。 其次研究了利用假絲酵母不對稱還原苯乙酮的情況，考察了各種反應(yīng)條件，如緩沖液pH值、反應(yīng)溫度、底物苯乙酮濃度和酵母細(xì)胞濃度等，對產(chǎn)物1-苯乙醇產(chǎn)率和e.e.值的影響，確定了較為適宜的反應(yīng)條件，使產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率高達(dá)99％，e.e.值基本穩(wěn)定在90.7％左右。并考察菌體培養(yǎng)條件、熱預(yù)處理對酵母