煙酸對(duì)脂肪細(xì)胞功能和動(dòng)脈粥樣硬化的影響及其機(jī)制.pdf

1、動(dòng)脈粥樣硬化性疾病是引起發(fā)達(dá)和部分發(fā)展中國(guó)家人們死亡的最主要原因。流行病學(xué)研究已經(jīng)證實(shí)高脂血癥是動(dòng)脈粥樣硬化最重要的危險(xiǎn)因素，而肥胖是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。已有研究表明脂肪細(xì)胞的功能改變是引起肥胖的核心因素。因此，研究脂肪細(xì)胞的功能對(duì)于肥胖、冠心病的防治具有重要意義。目前認(rèn)為，脂肪細(xì)胞功能改變與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)。近年來，更有學(xué)者認(rèn)為脂肪組織可能是治療動(dòng)脈粥樣硬化疾病的作用靶器官。 脂肪組織是體內(nèi)最大的能量?jī)?chǔ)存器官，脂肪細(xì)胞的

2、主要功能是以甘油三酯的形式儲(chǔ)存過多的能量。此外，它還是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官，可以分泌一系列脂肪因子，其中很多可能與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病有關(guān)。瘦素由脂肪細(xì)胞分泌，高瘦素血癥與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)，并且是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。脂肪細(xì)胞還在機(jī)體膽固醇代謝中發(fā)揮重要作用。脂肪組織是體內(nèi)最大的游離膽固醇儲(chǔ)存池，而且對(duì)循環(huán)血液中的膽固醇代謝起緩沖作用。膽固醇流出對(duì)脂肪細(xì)胞膽固醇代謝平衡的維持具有重大意義。核受體超家族的成員肝X受體(LXRα)及其上游

3、基因過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARγ)可通過作用靶基因三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體超家族(ABCA1，ABCG1)介導(dǎo)膽固醇流出，實(shí)現(xiàn)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)。 動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性疾病，炎癥反應(yīng)和血脂異常參與了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展。研究證實(shí)單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)、腫瘤壞死因子-α與動(dòng)脈粥樣硬化的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。脂肪細(xì)胞、單核細(xì)胞均可表達(dá)PPARγ及其下游靶基因CD36，目前認(rèn)為PPARγ和CD36在炎癥反應(yīng)和血脂

4、代謝過程中具有重要調(diào)控作用。 煙酸類藥物有著全面而獨(dú)特的調(diào)脂作用，對(duì)所有致動(dòng)脈粥樣硬化的血脂及脂蛋白產(chǎn)生有益作用，因其升高HDL-C作用最強(qiáng)且唯一降低脂蛋白(a)近年來在臨床上重新得到關(guān)注。臨床試驗(yàn)證明，煙酸類藥物能夠顯著降低冠心病的發(fā)病率和死亡率。煙酸類藥物的臨床益處不能完全由其降膽固醇作用來解釋，提示這類藥物可能具有降膽固醇外的多效性作用。煙酸作用的主要場(chǎng)所是脂肪組織，研究顯示煙酸類的心血管保護(hù)作用可能至少與其對(duì)脂肪細(xì)胞功能

5、的直接有益影響有關(guān)，但仍須進(jìn)一步的研究。 目的：觀察煙酸對(duì)高脂血癥兔血清瘦素及皮下脂肪組織瘦素、PPAγ及CD36mRNA表達(dá)的影響，并探討瘦素與PPARγ、CD36表達(dá)的相互關(guān)系；觀察煙酸對(duì)高脂血癥兔脂肪細(xì)胞LXRα、PPARγmRNA表達(dá)和HDL誘導(dǎo)的膽固醇流出的影響。觀察煙酸對(duì)高脂血癥兔動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成、血清及主動(dòng)脈組織分泌表達(dá)MCP-1的影響，闡明煙酸對(duì)脂肪細(xì)胞分泌功能的影響及探討其抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用機(jī)制。

6、 方法：選取12只健康雄性新西蘭兔給予高膽固醇飼料培養(yǎng)8周，建立高膽固醇兔模型后，隨機(jī)分為：(1)高膽固醇組：繼續(xù)飼以高膽固醇飼料6周；(2)煙酸治療組：在飼以高膽固醇飼料的基礎(chǔ)上給予煙酸緩釋劑0.2g．kg<'-1>．d<'-1>，共6周；另選普通飲食14周雄性新西蘭兔(n=6)作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取三組兔的腹股溝皮下脂肪行脂肪細(xì)胞培養(yǎng)，用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)瘦素、MCP-1水平；同時(shí)運(yùn)用半定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT

7、-PCR)檢測(cè)脂肪組織或脂肪細(xì)胞瘦素、LXRα、PPAγ、CD36及主動(dòng)脈組織MCP-1mRNA的表達(dá)；同位素法檢測(cè)氚標(biāo)記膽固醇(<'3>H-Cholesterol)由脂肪細(xì)胞至 HDL的流出率。此外，在體外觀察煙酸對(duì)脂肪細(xì)胞瘦素、LXRα、PPARγ及CD36mRNA表達(dá)的直接影響。 結(jié)果 1．高脂飲食8周使血清TC、LDL-C濃度顯著升高(P<0.001)。煙酸干預(yù)6周后顯著降低血清TC、LDL-C濃度(P<0.05

8、)，HDL-C濃度升高4.2％，與高脂組相比差異有顯著性(P<0.05)。 2．煙酸藥物治療6周后可降低高脂血癥兔血清及脂肪組織的瘦素水平(P<0.05)。半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)顯示煙酸治療可使高脂血癥兔皮下脂肪組織瘦素mRNA表達(dá)降低(P<0.05)。且與煙酸治療后脂肪細(xì)胞瘦素表達(dá)下調(diào)與PPARγ及CD36的表達(dá)升高呈正相關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)亦顯示，煙酸藥物呈濃度依賴性降低脂肪細(xì)胞瘦素mRNA表達(dá)和分泌，并濃度依賴性上調(diào)PPARγ及

9、CD36mRNA的表達(dá)。 3．煙酸藥物治療6周后可使高脂血癥兔脂肪細(xì)胞LXRαmRNA表達(dá)上調(diào)，同時(shí)膽固醇流出升高明顯；膽固醇流出率與LXRα mRNA表達(dá)升高呈正相關(guān)(r=0.71，P<0.05)。體外實(shí)驗(yàn)亦顯示，煙酸呈濃度依賴性升高脂肪細(xì)胞LXRα、PPARγmRNA的表達(dá)；膽固醇流出率與LXRα mRNA(r=0.83 P<0.01)和PPARγ，mRNA(r=0.76 P<0.05)的表達(dá)水平亦呈正相關(guān)。 4．煙

10、酸藥物治療6周后可使高脂血癥兔血清MCP-1水平降低31.1％(P<0.05)，并抑制高脂血癥兔主動(dòng)脈MCP-1 mRNA的表達(dá)(P<0.05)；高膽固醇飲食8周后，兔主動(dòng)脈內(nèi)膜較對(duì)照組顯著增厚，并明顯可見斑塊形成。煙酸干預(yù)6周后主動(dòng)脈內(nèi)膜厚度(28.54±6.37μm)小于高脂組(75.36±11.25μm，P<0.01)，斑塊面積(45.7±8.9％)也顯著小于高脂組(81.6±10.2％，P<0.01)。血清MCP-1水平與動(dòng)脈粥

11、樣硬化斑塊的面積呈正相關(guān)(r=0.71，P<0.01)。 結(jié)論 1．煙酸藥物治療能明顯地改善血脂譜，同時(shí)能降低高脂血癥兔血清及脂肪分泌瘦素水平，上調(diào)高脂兔脂肪細(xì)胞PPAR7及CD36mRNA的表達(dá)。 2．煙酸藥物治療能使高脂血癥兔脂肪細(xì)胞LXRα和PPARγmRNA的表達(dá)上調(diào)，同時(shí)促進(jìn)脂肪細(xì)胞HDL誘導(dǎo)的膽固醇流出。膽固醇流出的增加與其上調(diào)膽固醇逆轉(zhuǎn)錄關(guān)鍵靶基因 LXRα和PPARγ的表達(dá)相關(guān)。 3．煙酸