細胞凋亡與大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷關系的實驗研究.pdf

1、前言
　　 蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage，SAH)具有較高的發(fā)病率和死亡率，早期研究認為SAH后遲發(fā)性血管痙攣引起的腦組織缺血損害，是導致高死亡和高致殘的一個主要因素。研究表明SAH后遲發(fā)性血管痙攣發(fā)生于出血后3天左右，而出血48小時內的死亡率高達40％-60％，約35％病人在SAH后24小時內死亡，說明早期死亡因為不是由于SAH后遲發(fā)性血管痙攣導致。有學者提出了蛛網(wǎng)膜下腔出血后存在的早期腦損傷

2、(Early brain injury，EBI)是SAH早期致死致殘的主要因為，認為神經(jīng)細胞和血管內皮細胞凋亡起重要作用。本實驗在血管內穿刺建立大鼠SAH后早期腦損傷的模型基礎上，運用不同劑量的JNK抑制劑SP600125腹腔內注射干預，通過動態(tài)監(jiān)測Western Blotting法檢測海馬組織Caspase-3表達，TUNEL檢測基底動脈血管內皮細胞及海馬組織細胞凋亡，來進一步探討細胞凋亡與SAH后早期腦損傷的關系。
　　 材

3、料與方法
　　 健康SD大鼠120只(中國醫(yī)科大學動物實驗中心提供)，雄性，體重300-350g。隨機分成對照組，假手術組，蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)組，SAH+藥物干預組，SAH+DMSO組。采用血管內穿刺的方法制備大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)模型。對照組(20只)：未予任何處理取材；假手術組(20只)：除不刺破動脈外，其余均按制作SAH模型步驟操作；蛛網(wǎng)膜下腔出血組(20只)：按手術步驟建立SAH動物模型；SAH+藥物干預組：

4、藥物SP600125以二甲基亞砜(DMSO)為溶劑，在建立SAH前1小時及后6小時分別給予腹腔注射，并依據(jù)藥物不同劑量分為10mg/kg(20只)、30mg/kg(20只)；SAH+DMSO組：按照上一組的方法，以相同的體積腹腔注射DMSO。在建立SAH模型后24小時，分析大鼠的死亡率和神經(jīng)功能評分，運用透射電鏡、TUNEL凋亡檢測及Western Blotting法。各組數(shù)應用SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學

5、處理，P<0.05時，差異有顯著性意義。
　　 結果
　　 1、SAH后大鼠神經(jīng)行為功能異常，Western Blotting法檢測海馬組織Caspase-3表達增加，TUNEL檢測示基底動脈血管內皮細胞及海馬組織細胞凋亡。
　　 2、SP600125干預后，大鼠神經(jīng)行為功能異常有好轉，海馬組織Caspase-3表達下降，基底動脈血管內皮細胞及海馬組織細胞凋亡減少。
　　 結論
　　 1、蛛網(wǎng)膜下