動(dòng)脈粥樣硬化痰證小型豬LXRa和LXRb表達(dá)的變化.pdf

1、研究目的：動(dòng)脈粥樣硬化（AS）是一種慢性疾病，也是引發(fā)其他心腦血管疾病的最重要的因素之一。其主要病變特征是動(dòng)脈某些部位的內(nèi)膜下脂質(zhì)沉積，并伴有平滑肌細(xì)胞及纖維成分的增生，逐漸發(fā)展形成局部的斑塊。動(dòng)脈壁也因而增厚、變硬，斑塊組織內(nèi)部壞死崩解與沉積的脂質(zhì)結(jié)合，形成“粥樣”物質(zhì)的病理改變。因此脂類(lèi)代謝和血液流變學(xué)的異?？梢援?dāng)作是動(dòng)脈粥樣硬化的重要標(biāo)志。有其始動(dòng)因素在于飲食失節(jié)，過(guò)食肥甘，致脾氣虧虛，脾運(yùn)失常，水谷難以化生精微。中醫(yī)對(duì)AS的認(rèn)識(shí)

2、是逐步深入的，大部分學(xué)者均認(rèn)為AS與“痰”有關(guān)?！疤怠笔侨梭w水液代謝障礙所形成的病理產(chǎn)物。與AS密切相關(guān)的“痰”主要指祖國(guó)醫(yī)學(xué)所說(shuō)的“無(wú)形之痰”。 中醫(yī)藥在防治動(dòng)脈粥樣硬化方面具有潛在的優(yōu)勢(shì)和鮮明的特點(diǎn)，本研究造出動(dòng)脈粥樣硬化痰證的小型豬動(dòng)物模型以期為中醫(yī)微觀辨證提供依據(jù)；運(yùn)用分子生物學(xué)技術(shù)初步探討肝X受體a（LXRa）和肝X受體b（LXRb）在動(dòng)脈粥樣硬化痰證發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的表達(dá)變化。 研究方法：由于小型豬在解剖學(xué)、

3、生理學(xué)、營(yíng)養(yǎng)代謝等方面與人類(lèi)極為相似，疾病的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)歸等方面更接近與人類(lèi)。通過(guò)近交選育后的小型豬品種純、遺傳背景清楚，對(duì)實(shí)驗(yàn)?zāi)褪苄詮?qiáng)、反應(yīng)均衡、實(shí)驗(yàn)重復(fù)性高。所以本次研究以五指山小型豬（WZSP）作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。采用損傷頸動(dòng)脈加飼養(yǎng)高脂高膽固醇的方法制造動(dòng)脈粥樣硬化痰證的動(dòng)物模型。共飼養(yǎng)五指山小型豬20頭，隨機(jī)分成三組，正常組4頭，喂養(yǎng)基礎(chǔ)飼料；實(shí)驗(yàn)組分為兩組，一組飼養(yǎng)1.5％膽固醇，共8頭，另外一組飼養(yǎng)3％的膽固醇，共8頭。飼養(yǎng)周期

4、為十二個(gè)月。每月測(cè)定豬體重。飼養(yǎng)4個(gè)月后，每?jī)蓚€(gè)月（即6、8、10月）抽血檢測(cè)總膽固醇（TC）、甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）。最后將所有小型豬殺死取其心臟，肝臟，脾臟，肺臟，腎臟及脂肪組織放－80℃保存以提取各組織RNA分析與膽固醇代謝相關(guān)兩個(gè)基因LXRa和LXRb的組織表達(dá)差異。制備主動(dòng)脈組織切片，主動(dòng)脈取出后縱行切開(kāi)，10％福爾馬林固定，蘇丹III染色，肉眼觀察主動(dòng)脈內(nèi)膜硬化斑塊，其中內(nèi)膜表面粗糙

5、，有大片蘇丹III著色極深的為病變組織。而后石蠟包埋切片，HE染色，顯微鏡下觀察。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較，血漿TC、TG、LDL水平升高，HDL水平降低；實(shí)驗(yàn)組小型豬肝臟有大量的脂肪沉積，動(dòng)脈有明顯的脂質(zhì)條紋及斑塊；3％組較1.5％組病變明顯。3％的膽固醇組動(dòng)脈粥樣硬化小型豬肝臟，脂肪組織中的LXRa和LXRb的mRNA表達(dá)均上調(diào)。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng)小型豬可建立動(dòng)脈粥樣硬化痰證模型；動(dòng)脈粥樣硬化痰