2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、降鈣素(calcitonin,CT)是一種32個(gè)氨基酸組成的多肽類(lèi)激素。臨床應(yīng)用鮭魚(yú)降鈣素(salmon calcitonin,sCT)治療骨質(zhì)疏松,而現(xiàn)有給藥途徑僅僅注射和鼻噴兩種,且昂貴的價(jià)格也限制了它在我國(guó)的普及。實(shí)現(xiàn)鮭魚(yú)降鈣素的口服給藥(轉(zhuǎn)鮭魚(yú)降鈣素基因酵母yAGA2-sCT)將是最為理想的選擇。 為研究轉(zhuǎn)鮭魚(yú)降鈣素基因酵母(yAGA2-sCT)對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠的作用,我們建立了骨質(zhì)疏松大鼠模型,觀察sCT和yAGA2-s

2、CT對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠骨密度、骨形態(tài)計(jì)量學(xué)影響;同時(shí)檢測(cè)血鈣、血堿性磷酸酶、血清骨鈣素、血清胰島素樣生長(zhǎng)因子-1以及尿鈣、羥脯氨酸等經(jīng)典的骨代謝生化標(biāo)志物水平以觀察sCT和yAGA2-sCT對(duì)骨代謝的影響。實(shí)驗(yàn)分假手術(shù)組、模型對(duì)照組、sCT組及yAGA2-sCT組。通過(guò)大鼠股骨X光照片、光鏡觀察及骨密度值檢測(cè)說(shuō)明骨質(zhì)疏松大鼠造模成功。sCT組及yAGA2-sCT組的腰椎和股骨骨密度及骨代謝生化標(biāo)志物水平明顯得到改善,提示sCT及yAGA2-

3、sCT通過(guò)抑制骨吸收從而抑制了骨質(zhì)疏松。sCT組及yAGA2-sCT組兩組比較差異無(wú)顯著性,提示口服yAGA2-sCT與sCT注射液對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠有相似的作用,均具有干預(yù)骨重建、抑制骨質(zhì)疏松的作用。 為進(jìn)一步探討轉(zhuǎn)鮭魚(yú)降鈣素基因酵母(yAGA2-sCT)對(duì)骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制,我們觀察了yAGA2-sCT對(duì)體外成骨細(xì)胞的作用。應(yīng)用酶消化-連續(xù)組織塊法體外培養(yǎng)大鼠成骨細(xì)胞,觀察sCT和yAGA2-sCT對(duì)體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞增殖、分化、

4、礦化功能的影響。經(jīng)病理學(xué)檢查及染色證實(shí)體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞成功;sCT及yAGA2-sCT對(duì)體外培養(yǎng)大鼠成骨細(xì)胞的增殖、分化和礦化功能具有刺激作用。 眾所周知老年患者發(fā)生骨質(zhì)疏松的同時(shí)常常伴發(fā)血管鈣化。近來(lái)認(rèn)為三個(gè)新發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子家族成員骨保護(hù)素(Osteoprotegrin,OPG),核因子kB受體激活物配體(Receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)和

5、核因子kB受體激活物(Receptor aCtivator of nuclear factor kappaB,RANK),亦稱OPG/RANKL/RANK系統(tǒng),參與骨質(zhì)疏松和血管鈣化的調(diào)節(jié)過(guò)程,是這兩種伴發(fā)疾病之間的分子聯(lián)系。 為研究OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)在血管鈣化中的調(diào)節(jié)作用以及降鈣素對(duì)OPG/RANKL/RANK途徑的干預(yù)作用,本實(shí)驗(yàn)建立了大鼠動(dòng)脈鈣化模型,病理學(xué)觀察血管鈣化情況,測(cè)定血管組織中鈣含量及堿性磷酸酶活

6、性,免疫組化法檢測(cè)OPG和RANKL在血管組織中的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)分對(duì)照組、模型組、sCT組及yAGA2-sCT組。病理學(xué)觀察成功建立維生素D3誘發(fā)的血管鈣化模型;與對(duì)照組比較,鈣化血管組織中鈣含量及堿性磷酸酶活性增高;模型組血管壁OPG表達(dá)明顯減少而RANKL表達(dá)明顯增加。與模型組比較,sCT組和yAGA2-sCT組血管鈣化程度明顯減輕,血管壁OPG表達(dá)明顯增加而RANKL表達(dá)明顯減少。提示OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)參與血管鈣化的調(diào)節(jié)

7、,sCT和yAGA2-sCT可通過(guò)OPG/RANKL/RANK途徑有效抑制血管鈣化。 為進(jìn)一步觀察RANKL對(duì)大鼠血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)體外鈣化的調(diào)節(jié)作用及降鈣素對(duì)其調(diào)節(jié)作用的影響,我們體外培養(yǎng)大鼠VSMC,建立體外VSMC鈣化模型,在培養(yǎng)介質(zhì)中分別加入RANKL及降鈣素,觀察細(xì)胞鈣沉積及細(xì)胞減性磷酸酶活性、骨鈣素的變化情況。VSMC經(jīng)von Kossa染色證實(shí)動(dòng)脈鈣化

8、模型成功建立。實(shí)驗(yàn)分對(duì)照組、鈣化模型組、RANKL組、sCT組及yAGA2-sCT組。鈣化模型組、RANKL組、sCT組及sCT組鈣沉積、堿性磷酸酶活性、骨鈣素水平明顯高于對(duì)照組;與鈣化模型組比較,RANKL組鈣沉積、堿性磷酸酶活性、骨鈣素水平均明顯增高;與RANKL組比較,sCT組和yAGA2-sCT組鈣沉積、堿性磷酸酶活性、骨鈣素水平明顯降低。提示RANKL促進(jìn)鈣化培養(yǎng)的VSMC鈣沉積、堿性磷酸酶活性及骨鈣素的表達(dá),而sCT和yAG

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