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文檔簡介
1、目的:研究七葉皂苷(β-aescin)聯(lián)合氟尿嘧啶(5-FU)的協(xié)同抗腫瘤作用及其機(jī)制.
方法:七葉皂苷和5-FU濃度比分別為4:1和2:1的一序列濃度組合及七葉皂苷和5-FU單獨(dú)用藥的不同濃度,作用于人肺腺癌A549、H1299細(xì)胞和人肝癌SMMC-7721、Bel-7402細(xì)胞,采用MTT法觀察單獨(dú)及聯(lián)合用藥對以上四種細(xì)胞的增值抑制作用,運(yùn)用等效曲線.相互指數(shù)法(Isoboles-Interaction itdex m
2、ethod)評價聯(lián)合用藥的效果;建立小鼠肉瘤S180和肝癌H22模型,進(jìn)一步觀察七葉皂苷和5-FU聯(lián)合用藥的體內(nèi)抑瘤作用,計(jì)算抑瘤率和胸腺、脾臟指數(shù),并對腫瘤組織進(jìn)行HE切片染色,觀察聯(lián)合用藥對腫瘤組織中腫瘤細(xì)胞生長的影響;以肝癌SMMC-7721細(xì)胞為研究對象,采用流式細(xì)胞儀檢測聯(lián)合用藥對細(xì)胞周期分布的影響,AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記檢測細(xì)胞凋亡,使用Caspase-3、8、9活性檢測試劑盒檢測Caspase-3、8、9酶
3、活性的變化,Western Blot檢測抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表達(dá).
結(jié)果:七葉皂苷聯(lián)合5-FU在體外有明顯的協(xié)同抗腫瘤作用,作用形式有一定的細(xì)胞和給藥方案依賴性.在體內(nèi),七葉皂苷聯(lián)合5-FU能協(xié)同抑制荷瘤小鼠腫瘤的生長;聯(lián)合用藥還能明顯改善由5-FU引起的免疫抑制狀況,并致腫瘤組織中腫瘤細(xì)胞大面積壞死。聯(lián)合用藥能協(xié)同阻滯SMMC-7721細(xì)胞周期于GO/G1期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、上調(diào)Caspase-3、8、9酶活性和下調(diào)
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