七葉皂苷聯(lián)合氟尿嘧啶的協(xié)同抗腫瘤作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究七葉皂苷(β-aescin)聯(lián)合氟尿嘧啶(5-FU)的協(xié)同抗腫瘤作用及其機(jī)制.
　　 方法：七葉皂苷和5-FU濃度比分別為4:1和2:1的一序列濃度組合及七葉皂苷和5-FU單獨(dú)用藥的不同濃度，作用于人肺腺癌A549、H1299細(xì)胞和人肝癌SMMC-7721、Bel-7402細(xì)胞，采用MTT法觀察單獨(dú)及聯(lián)合用藥對以上四種細(xì)胞的增值抑制作用，運(yùn)用等效曲線．相互指數(shù)法(Isoboles-Interaction itdex m

2、ethod)評價聯(lián)合用藥的效果；建立小鼠肉瘤S180和肝癌H22模型，進(jìn)一步觀察七葉皂苷和5-FU聯(lián)合用藥的體內(nèi)抑瘤作用，計(jì)算抑瘤率和胸腺、脾臟指數(shù)，并對腫瘤組織進(jìn)行HE切片染色，觀察聯(lián)合用藥對腫瘤組織中腫瘤細(xì)胞生長的影響；以肝癌SMMC-7721細(xì)胞為研究對象，采用流式細(xì)胞儀檢測聯(lián)合用藥對細(xì)胞周期分布的影響，AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記檢測細(xì)胞凋亡，使用Caspase-3、8、9活性檢測試劑盒檢測Caspase-3、8、9酶

3、活性的變化，Western Blot檢測抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表達(dá).
　　 結(jié)果：七葉皂苷聯(lián)合5-FU在體外有明顯的協(xié)同抗腫瘤作用，作用形式有一定的細(xì)胞和給藥方案依賴性.在體內(nèi)，七葉皂苷聯(lián)合5-FU能協(xié)同抑制荷瘤小鼠腫瘤的生長；聯(lián)合用藥還能明顯改善由5-FU引起的免疫抑制狀況，并致腫瘤組織中腫瘤細(xì)胞大面積壞死。聯(lián)合用藥能協(xié)同阻滯SMMC-7721細(xì)胞周期于GO/G1期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、上調(diào)Caspase-3、8、9酶活性和下調(diào)