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1、目的:研究參與雌激素合成的細(xì)胞色素P45017(Cytochrome P45017,CYP17)及雌激素代謝的兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(catechol-O-methyl transferase,COMT)基因多態(tài)性與山東地區(qū)漢族人乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染后肝硬化、肝細(xì)胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)的關(guān)系。 方法: 1.按照2000年9月在西安由中華醫(yī)學(xué)
2、傳染病與寄生蟲(chóng)病學(xué)分會(huì)與肝病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂的病毒性肝炎防治方案的診斷標(biāo)準(zhǔn)篩選404例HBV感染者,結(jié)合臨床情況分為四組,即慢性無(wú)癥狀HBV攜帶組96例、慢性乙型肝炎組(CHB組)87例、乙肝肝硬化組117例、乙肝相關(guān)性肝癌組(HCC組)99例,同時(shí)選取85例健康人群進(jìn)行研究。 2.采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定乙型肝炎病毒系統(tǒng),基因組DNA快速制備試劑盒提取抗凝血目的DNA,應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù)(PCR-RFLP)檢
3、測(cè)CYP17基因轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游34bp處的T/C多態(tài)及COMT基因第四外顯子第158位密碼子G/A多態(tài)。 3.采用SPSS13.0,應(yīng)用擬合優(yōu)度x2檢驗(yàn)判斷基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡,分析各組基因型頻率有無(wú)差異(雙側(cè)),α=0.05。以攜帶者組為參照,用Logistic回歸模型計(jì)算各基因型的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(OR)和95%可信區(qū)間(confidenceinterval,CI),并調(diào)整了年齡、性別、吸煙等混雜因素,
4、p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果: 1.在對(duì)照組中,CYP17 A1/A1、A1/A2和A2/A2 3種基因型頻率分別為20.0%、47.5%和32.5%,COMT Val/Val、Val/Met和Met/Met 3種基因型頻率分別為39.0%、48.1%和13.0%,基因型分布均符合Hardy-weinberg平衡定律,p>0.05,具有群體代表性。 2.將所有HBV感染病例與正常組進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)CYP1
5、7 A1/A1、A1/A2和A2/A2 3種基因型及COMT Val/Val、Val/Met和Met/Met 3種基因型頻率在兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.慢性乙型肝炎組與慢性HBV攜帶者相比,慢性乙型肝炎組CYP17(-34)的純合多態(tài)基因型(A2/A2)頻率顯著高于攜帶者組分別為(29.3%:15.4%),A2/A2基因型與其他基因型相比OR值為2.28(1.08~4.78),p:0.03。但對(duì)男女分別進(jìn)行分析時(shí),差異均變
6、為無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。A1/A1基因型及A1/A2基因型在兩組中的差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.乙肝肝硬化組與慢性HBV攜帶者比較,A1/A1、A1/A2和A2/A2基因型的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;A2/A2基因型的OR值為1.68(0.81~3.46),p>0.05;當(dāng)分別對(duì)男性、女性及絕經(jīng)后的婦女(年齡>55歲)進(jìn)行分析時(shí),3種基因型頻率在肝硬化組與攜帶者組中的差異仍無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 5.HCC患者和慢性HBV攜帶者相比,A2/A2基
7、因型所占的比例為30.3%:15.4%,OR值為2.38(1.16~4.88),p:0.02,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而這種差異在女性患者中表現(xiàn)突出,OR值為5.93(1.84~19.16),p:0.002,而在男性患者中p值為0.51,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。當(dāng)分析限定在絕經(jīng)后的婦女(年齡>55歲)時(shí),OR增加至6.18(1.74~22.03),p:0.003。A1/A2基因型頻率在女性肝癌病例(35.5%)明顯低于女性攜帶者組(60.8%),P
8、:0.04。A1/A1基因型與其他基因型相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 6.分別對(duì)慢性乙型肝炎組、乙肝肝硬化組、HCC組與慢性HBV攜帶者的COMT多態(tài)進(jìn)行了分析比較,未發(fā)現(xiàn)各組的COMT基因型頻率差異有顯著性。 7.應(yīng)用多因素非條件logistic回歸分析,發(fā)現(xiàn)在女性個(gè)體中,除了年齡和CYP17 A2/A2基因型之外的另一獨(dú)立危險(xiǎn)因素:吸煙(OR: 11.21;95%CI:1.19-19.87; P:0.04)。
9、 結(jié)論: 1.CYP17轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游34bp處T/C多態(tài)與山東地區(qū)漢族人HBV感染后肝硬化的發(fā)生可能無(wú)關(guān)。 2.CYP17(-34)多態(tài)位點(diǎn)A2/A2基因型明顯增加了山東地區(qū)漢族女性HBV感染患者HCC的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),CYP17 A2/A2基因型可能是女性HBV感染后HCC發(fā)病的易感基因;A1/A2基因型可能是女性HBV感染者HCC發(fā)病的抗性基因。 3.COMT基因第四外顯子第158位密碼子G/A多態(tài)與山東地區(qū)漢
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