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1、目的:建立橫紋肌肉瘤耐藥模型,好樣的我藥耐藥相關(guān)標(biāo)志mdrl、mrp的表達(dá),了解P-糖蛋白(P-gp )、多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)在眼眶橫紋肌肉瘤組織中的關(guān)系及臨床意義,為闡明眼眶橫紋肌肉瘤多藥耐藥(MDR)機(jī)理、改善化療方案、判斷預(yù)后及逆轉(zhuǎn)耐藥提供理論依據(jù)和臨床實(shí)際參考.方法:1.以長(zhǎng)春新堿(VCR)為誘導(dǎo)劑,濃度遞增法對(duì)人橫紋肌肉瘤細(xì)胞系RD細(xì)胞在體外進(jìn)行誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn),建立耐VCR的橫紋肌肉瘤耐藥細(xì)胞系RD/VCR.2.細(xì)胞計(jì)數(shù)法分析
2、細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn),MTT法檢測(cè)藥物敏感性,光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡觀察耐藥后細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化.RT-PCR法定量分析RD、RD/VCR細(xì)胞中mdrl和mp基因表達(dá)水平,免疫組化法檢測(cè)RD、RD/VCR細(xì)胞中P-gp、MRP的表達(dá).3.免疫組化法檢測(cè)42例眼眶橫紋肌肉瘤組織和10例正常眼眶組織中P-gp、MRP的表達(dá)狀況.結(jié)論:1.VCR可誘導(dǎo)橫紋肌肉瘤細(xì)胞產(chǎn)生多藥耐藥,其機(jī)制與mdrl/P-gp和mrp/MRP表達(dá)有關(guān),在形態(tài)學(xué)研究中,電鏡
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