Legumain在人眼眶橫紋肌肉瘤中的表達(dá)及其與腫瘤侵襲性的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　 1.檢測(cè)人眼眶橫紋肌肉瘤（rhabdomyosarcoma，RMS）組織中l(wèi)egumain的表達(dá)，觀察legumain的表達(dá)與RMS生物學(xué)行為之間的關(guān)系。并對(duì)橫紋肌肉瘤患者的多個(gè)臨床指標(biāo)與患者預(yù)后進(jìn)行多因素分析，對(duì)影響生存率的獨(dú)立因素進(jìn)行分析討論。
　　 2.檢測(cè)經(jīng)不同濃度的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（transforming growth factorβ，TGF-β）刺激之后人胚胎型RMS細(xì)胞系RD細(xì)胞中l(wèi)eguma

2、in及α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-smoothmuscle actin，α-SMA）表達(dá)的變化，探討legumain在RD細(xì)胞中的作用，為腫瘤的治療提供新的思路和策略。
　　 方法：
　　 1.應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)56例人眼眶RMS患者手術(shù)標(biāo)本中l(wèi)egumain的表達(dá)，并引入年齡、性別、組織學(xué)類型、腫瘤大小、是否累及眼瞼等因素進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，觀察各因素與患者預(yù)后的關(guān)系。
　　 2.首先利用細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)legu

3、main在RD細(xì)胞中的表達(dá)情況，并使用不同濃度的TGF-β對(duì)RD細(xì)胞進(jìn)行刺激，通過(guò)RT-PCR以及Western-blot技術(shù)檢測(cè)刺激前后legumain及α-SMA在RD細(xì)胞中表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.legumain在56例RMS組織中有25例高表達(dá)，并且其表達(dá)高低、腫瘤大小、組織學(xué)類型、是否累及眼瞼等因素是影響橫紋肌肉瘤患者生存率的獨(dú)立臨床因素。
　　 2.通過(guò)細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)到RD細(xì)胞中存在

4、legumain的表達(dá)，并且legumain及α-SMA的表達(dá)在2.5ng/ml的TGF-β刺激后較正常對(duì)照組明顯升高，而5ng/ml刺激后RD細(xì)胞中l(wèi)egumain及α-SMA的表達(dá)較正常對(duì)照組明顯降低。
　　 結(jié)論：
　　 1.legumain在RMS組織中具有較高的表達(dá)，檢測(cè)人眼眶RMS組織中l(wèi)egumain的表達(dá)有望成為判斷腫瘤惡性程度以及患者預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)，并為以后臨床治療眼眶RMS提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　

5、 2.Legumian低表達(dá)、腫瘤≤5cm、胚胎型RMS、腫瘤未累及眼臉的病人均具有較高生存率。而患者的年齡、性別因素與患者的預(yù)后無(wú)關(guān)。
　　 3.低濃度的TGF-β刺激提高了RD細(xì)胞中l(wèi)egumain及α-SMA的表達(dá)，而高濃度的TGF-β刺激降低了RD細(xì)胞中l(wèi)egumain及α-SMA的表達(dá)，由于低濃度的TGF-β可以促進(jìn)RD細(xì)胞的生長(zhǎng)，而高濃度的TGF-β可以通過(guò)某種途徑抑制RD細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此，legumain可能通過(guò)