黃芪多糖的硒化修飾及其體外抗氧化作用的研究.pdf

1、黃芪是一味歷史悠久，臨床應(yīng)用十分廣泛，為歷代中醫(yī)最為常用的中藥之一。其有效成分黃芪多糖具有多種藥理作用。將多糖與硒有機結(jié)合成的硒多糖，其化學(xué)結(jié)構(gòu)是硒與單糖上兩個順式相鄰羥基形成五員環(huán)的亞硒酸酯。硒多糖作為一種有機硒化合物，充分發(fā)揮了硒和多糖的生理活性，使兩者的作用相互協(xié)調(diào)并增強，同時有效提高了硒的生物可利用度及其作為生物必需微量元素的生理功能，毒性和副作用比無機硒大大降低。
　　 本研究選擇中藥黃芪作為研究對象，采用水提法分步提

2、取出黃芪粗多糖，并通過去蛋白，去色素，層析過柱等純化方法得到四種純化后的黃芪多糖；然后通過硒化修飾使之有機結(jié)合上硒，制備得到具有更強功效的硒化黃芪多糖，并分析其體外抗氧化作用。為其作為免疫佐劑應(yīng)用于畜禽疫苗從而增強疫苗的免疫效能提供理論依據(jù)和基礎(chǔ)。
　　 試驗1研究了黃芪多糖的提取和純化方法。采用傳統(tǒng)的水提醇沉法對蒙古黃芪根中的多糖進行提取，首先用一步醇沉法提取黃芪粗多糖（APSt），再用分步醇沉法提取并選擇三種組分的黃芪多糖A

3、PS40、APS50和APS70。然后用三氯乙酸法脫除其中的蛋白，用過氧化氫去色素后，再用DEAE A-25柱和Sephadex G-75柱層析進一步純化。結(jié)果表明，經(jīng)純化后，各組分黃芪多糖的多糖含量提高，蛋白質(zhì)含量降低，表明所選用各方法可行，有利于提高多糖純度。
　　 試驗2研究了黃芪多糖的硒化修飾方法。采用鋇離子、氫離子催化，將多糖類化合物與亞硒酸或其鹽在酸性條件下反應(yīng)進行黃芪多糖的硒化修飾，以產(chǎn)物量和產(chǎn)物中硒含量為指標，正

4、交設(shè)計對硒化反應(yīng)溫度、亞硒酸鈉添加量和硒化反應(yīng)時間進行優(yōu)選。9種條件所得9種多糖標記為seAPS-1、seAPS-2、seAPS-3、seAPS-4、seAPS-5，seAPS-6、seAPS-7、seAPS-8和seAPS-9，原子熒光吸收法測定其硒含量。用上述所得最佳修飾條件對一步提取的APSt和分步醇沉提取的APS40、APS50和APS60進行硒化修飾，并測定它們的產(chǎn)物硒含量。結(jié)果顯示，反應(yīng)溫度70℃，5mg/ml Na2SeO