肌球蛋白重鏈基因MyHC與中國地方雞肌肉品質(zhì)之間的相關(guān)研究.pdf

1、清遠麻雞以其體型小、皮下和肌間脂肪發(fā)達、皮薄骨軟而著名，現(xiàn)在已經(jīng)成為我國活雞出口的小型肉用名產(chǎn)雞之一；魯兩斗雞屬玩賞型，但是體型高達魁梧，體質(zhì)健壯，體軀長，類似鴕鳥身，尤其是胸腿肌發(fā)達，具有良好的胸肌腿肌產(chǎn)量，在我國地方肉雞生產(chǎn)中常被用作雜交父本。本研究選用魯西斗雞和清遠麻雞作為主要的實驗材料，對其進行了骨骼肌細胞類型分析，以及生長和肉質(zhì)測定，并檢測了相關(guān)基因的表達情況。 實驗以處于生長曲線拐點處的10只青年魯西斗雞和15只青年

2、清遠麻雞為研究對象，采集了體重、脛骨長數(shù)據(jù)和胸淺肌、腓腸肌的肌肉樣品。在個體水平，測定了胸淺肌、腓腸肌的pH值、失水率、剪切力；在組織水平，對胸淺肌腓腸肌分別冰凍切片，SDH染色結(jié)合Image Pro-plus軟件鑒定分析組織中的紅肌纖維、中間型纖維、白肌纖維及獲得其參數(shù)；在分子角度，提取總RNA，以GAPDH為對照，通過RT-PCR定性地鑒定SMl、M2、U、IMFH的表達，利用Real-TimePCR對不同品種不同組織中四個基因的表

3、達進行了量化測定。 SDH染色后統(tǒng)計分析，魯西斗雞胸淺肌中的中間型纖維和紅肌纖維表現(xiàn)出了相同的變化趨勢，肌纖維密度和數(shù)量比例均低于清遠麻雞的，但是肌纖維直徑大于清遠麻雞直徑。為了更進一步分析不同組織類型對肌纖維參數(shù)的影響，將肌肉組織分為了含有紅肌型、中間型、白肌型的RMW型，含有中間型和白肌型纖維的MW型以及僅含白肌纖維的W型。魯西斗雞胸淺肌中含有33％的RMW型肌肉組織，清遠麻雞中還有5.3％的RMW型胸淺肌，這與胸淺肌中較高

4、比例紅肌纖維有關(guān)，RMW型的魯西斗雞胸淺肌的剪切力要小于相同類型胸淺肌的清遠麻雞。性別效應(yīng)不顯著。肉質(zhì)品質(zhì)顯示，清遠麻雞胸淺肌的肉質(zhì)嫩度與魯西斗雞的胸淺肌的肉質(zhì)嫩度差異不顯著。慢縮型肌球蛋白SMl、慢縮型肌球蛋白SM2、快縮型U、肌內(nèi)脂肪基因IMFH四個基因用于評定不同品種不同組織不同組織類型間的基因表達差異。定量PCR數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示，在不同組織類型中，RMW的含量越多，紅肌纖維數(shù)量越多，SM2的表達量越高；SM1與SM2的表達具有相同的

5、趨勢，但是表達量要比后者低一些，SMl的表達量與紅肌纖維的直徑顯著正相關(guān)，即紅肌纖維的直徑越大，SMl的表達量越高。基因U的表達量極低，與肉質(zhì)幾乎無相關(guān)性，所以不予考慮。肌內(nèi)脂肪基因IMFH在胸淺肌和腓腸肌中的表達趨勢與SM2的表達趨勢相似，且與SM2極顯著相關(guān)(P<0.01)。這也從側(cè)面說明了紅肌纖維數(shù)量越多肉質(zhì)越嫩的另一個原因，肌內(nèi)脂肪含量較高。 改進后的SDH染色借助灰度值范圍，可有效鑒別三種纖維類型，紅肌纖維在品種間存在