西妥昔單抗對鼻咽癌細(xì)胞放療增敏作用的體外研究.pdf

1、目的：
　　 表皮生長因子受體EGFR(Epidemal growth factor receptor)在許多類型的實(shí)體腫瘤如頭頸部鱗癌、宮頸癌、乳腺癌、消化道腫瘤、卵巢癌及膀胱癌等呈過度表達(dá)。EGFR的表達(dá)在腫瘤細(xì)胞衍生、凋亡、去分化、新血管形成、侵襲及轉(zhuǎn)移等過程發(fā)揮著重要的作用,與腫瘤放療敏感性及預(yù)后密切相關(guān)。西妥昔單抗(Cetuximab、Erhitux、IMC-C225)是一種人/鼠嵌合型IgG1單克隆抗體,可以競爭性地

2、與表皮生長因子受體EGFR結(jié)合,阻斷其通路的激活,從而抑制細(xì)胞增殖、惡變、侵襲及轉(zhuǎn)移。在很多研究中,西妥昔單抗不但顯示出很強(qiáng)的抗瘤活性,而且與放療聯(lián)合時可明顯提高其療效。本研究通過表皮生長因子受體抑制劑西妥昔單抗作用于鼻咽癌細(xì)胞CNE-2Z,觀察其對細(xì)胞的放療增敏作用及其相關(guān)機(jī)制。
　　 方法：
　　 選用人鼻咽癌細(xì)胞系CNE-2Z為研究對象。免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測細(xì)胞表面的EGFR表達(dá),MTT法及成克隆分析法測定西妥昔單抗

3、對CNE-2Z的細(xì)胞增殖抑制作用及放療增敏作用,流式細(xì)胞儀(FCM)檢測細(xì)胞周期分布。
　　 結(jié)果：
　　 1、免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測CNE-2Z細(xì)胞表面EGFR表達(dá)狀態(tài)為+++。
　　 2、MTT法檢測不同濃度西妥昔單抗作用于CNE-2Z細(xì)胞48小時后細(xì)胞增殖抑制率,計算出IC50=24.85ug/mL,以1/5的IC50即5ug/L為實(shí)驗(yàn)加藥濃度。
　　 3、西妥昔單抗聯(lián)合射線作用于CNE-2Z抑制了細(xì)胞

4、的增殖。MTT結(jié)果顯示,單照射組、單藥組、照射前、后給藥組細(xì)胞的增殖抑制率分別為16.18％、19.36%、29.98%、26.27%,照射聯(lián)合用藥組明顯高于單照組和單藥組(P＜0.05)。而照射前、后給藥組無明顯差異(P=0.501)。
　　 4、成克隆分析法測細(xì)胞的放射生物學(xué)參數(shù)。結(jié)果顯示,照射聯(lián)合給予西妥昔單抗,CNE-2Z細(xì)胞DO值,Dq值,SF2值均較單照射組降低(P＜0.05),D0值、Dq值比(SERD0、SERD

5、q)均大于1。結(jié)果證實(shí),西妥昔單抗具有放療增敏作用。照射前給藥和照射后給藥組比較,后者的D0、Dq、SF2、SER均較前者略增高,但兩者無顯著差異(P＞0.05)。
　　 5、細(xì)胞周期檢測發(fā)現(xiàn),單用藥組G1期細(xì)胞比例明顯增加;單照射組細(xì)胞大多處于G2+M期;放療前和放療后加藥組以G1期、G2+M期為主,S期細(xì)胞比例減少,兩者各周期分布比例間無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 西妥昔單抗對CNE-2