TPX2、Aurora-A和PCNA在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、腦膠質(zhì)瘤是一種常見的原發(fā)性顱內(nèi)惡性腫瘤，約占顱內(nèi)腫瘤的46％。由于膠質(zhì)瘤多呈侵襲性生長，血供豐富，且生長速度快，與正常腦組織分界不清，具有手術(shù)完全切除困難術(shù)后放化療效果差，復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅著患者的健康。為了提高膠質(zhì)瘤患者的生存質(zhì)量，拓展膠質(zhì)瘤的治療方法，關(guān)于腦膠質(zhì)瘤的研究逐漸成為熱點(diǎn)，相關(guān)的研究不斷深入。膠質(zhì)瘤的形成是多因素、多種機(jī)制共同影響下神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生一系列的復(fù)雜的改變的過程。生命之所以能夠延續(xù)下去歸根結(jié)底是由于母細(xì)胞不

2、斷的分裂，子細(xì)胞不斷地產(chǎn)生。我們通常將從子細(xì)胞的產(chǎn)生開始到下一次形成子細(xì)胞的過程定義為一個細(xì)胞周期。由于體細(xì)胞增殖的過程都要經(jīng)過細(xì)胞有絲分裂，細(xì)胞周期的穩(wěn)定尤為重要。膠質(zhì)瘤的形成過程中往往有細(xì)胞周期紊亂，染色體復(fù)制異常，多倍體異倍體形成。因此，細(xì)胞周期改變對腫瘤調(diào)控格外重要。細(xì)胞有絲分裂期間，染色體嚴(yán)密地進(jìn)行分裂需要依靠紡錘體及時有效準(zhǔn)確的發(fā)揮其作用，然而紡錘體則是由具有不同功能的蛋白骨架（微管）組成。微管的形成受多種相關(guān)蛋白的調(diào)節(jié)，靶

3、向Xklp2靶蛋白(targetingproteinforXenopuskinesin-likeprotein2，TPX2)和極光蛋白(serine/threonine-proteinkinase6，Aurora-A)是最新發(fā)現(xiàn)的兩種與微管有密切關(guān)聯(lián)的蛋白，可激發(fā)并調(diào)控紡錘體的成熟以及細(xì)胞中心體的復(fù)制、成熟和分裂。目前發(fā)現(xiàn)，乳腺癌、卵巢癌和食管癌等的發(fā)生與二者有著極其密切的聯(lián)系。因此，微管組裝和調(diào)控對細(xì)胞分裂以及腫瘤的形成具有重要意義。

4、
　　 目的:本研究旨在了解增殖細(xì)胞核抗原(ProliferatingCellNuclearAntigen簡稱PCNA)、TPX2和Aurora-A在不同級別人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況，并以PCNA為陽性參照，探討TPX2和Aurora-A對膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展中的作用以及二者相關(guān)性。
　　 方法:本研究采用免疫組織化學(xué)的方法，檢測TPX2、Aurora-A和PCNA在50例不同級別人腦膠質(zhì)瘤組織和10例正常人腦組織（內(nèi)減壓和

5、皮層造瘺切除的腦組織）中的表達(dá)情況。按照WHO(2007年修改)神經(jīng)上皮組織腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)病理診斷，利用隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)選取低度惡性組Ⅱ級和高度惡性組(Ⅲ級和Ⅳ級)各25例，正常腦組織組10例。所有標(biāo)本術(shù)前均未接受放化療。對三者的結(jié)果分析采用半定量分析方法，對陽性染色結(jié)果進(jìn)行評分，即在高倍視野(400×)隨機(jī)選擇五個區(qū)域，每個區(qū)域計數(shù)100個細(xì)胞，以胞核及胞漿出現(xiàn)黃色或棕黃色著色為陽性表達(dá)。著色評價如下:0分代表無染色;1分代表弱著色;2分

6、代表輕度著色;3分代表重度著色。細(xì)胞評價如下:0分代表沒有腫瘤細(xì)胞;1分代表腫瘤細(xì)胞占0％～10％;2分代表腫瘤細(xì)胞占11％～50％;3分代表腫瘤細(xì)胞占50％以上。兩種得分相加介于0-1分為"-";介于2-3分為"+";4-5分為"++";6-9分為"+++"。通過分值的累積值來判斷三者的表達(dá)情況，進(jìn)而來分析三者與有絲分裂的關(guān)系。實驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。
　　 結(jié)果:TPX2在正常腦組織中均未見表達(dá)，在膠

7、質(zhì)瘤組織中的陽性表達(dá)率為62.0％(31/50)，其中，Ⅱ級陽性表達(dá)的有11例，Ⅲ-Ⅳ級中陽性表達(dá)的有20例，x2=19.315，P＜0.01，正常對照組，Ⅱ級和Ⅲ-Ⅳ級三組之間TPX2的表達(dá)有統(tǒng)計學(xué)差異。Aurora-A在正常腦組織中均未見表達(dá)，在膠質(zhì)瘤組織中的陽性表達(dá)率為56.0％(28/50)，其中，Ⅱ級陽性表達(dá)的有10例，Ⅲ-Ⅳ級中陽性表達(dá)的有18例，x2=15.643，P＜0.01，正常對照組，Ⅱ級和Ⅲ-Ⅳ級三組之間Auror

8、a-A的表達(dá)有統(tǒng)計學(xué)差異。PCNA在正常腦組織中均未見表達(dá)，在膠質(zhì)瘤組織中的陽性表達(dá)率68.0％(34/50)，其中，Ⅱ級陽性表達(dá)的有12例，Ⅲ-Ⅳ級中陽性表達(dá)的有22例。應(yīng)用SPSS17.0軟件處理數(shù)據(jù)，x2=21.530，P＜0.01，正常對照組，Ⅱ級和Ⅲ-Ⅳ級三組之間PCNA的表達(dá)有統(tǒng)計學(xué)差異。膠質(zhì)瘤中Aurora-A和TPX2的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.521，P＜0.01)。通過隨訪證實Aurora-A、TPX2強(qiáng)陽性表達(dá)的患者較

9、二者均陰性或呈弱陽性表達(dá)者生存期明顯縮短。
　　 結(jié)論:
　　 1TPX2蛋白在腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤中表達(dá)水平明顯高于正常腦組織，而且隨著腫瘤分期越晚或組織病理學(xué)分級越差，TPX2的表達(dá)水平越高。則提示該蛋白與膠質(zhì)瘤的惡性增殖有密切關(guān)系，是腦膠質(zhì)瘤的惡性生物學(xué)特性標(biāo)志之一。
　　 2Aurora-A在膠質(zhì)瘤中高表達(dá)，尤其在高級別膠質(zhì)瘤中更顯著，而正常腦組織中則檢測不到Aurora-A表達(dá)，該基因是惡性膠質(zhì)瘤的一個新的標(biāo)志

10、物，可作為分子治療的靶點(diǎn)之一。
　　 3PCNA是一種常見的細(xì)胞核增殖抗原在腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤中有陽性表達(dá)，而且它的表達(dá)水平與腦膠質(zhì)瘤的分級有關(guān)，它在惡性程度高的膠質(zhì)瘤細(xì)胞中表達(dá)水平比低級別膠質(zhì)細(xì)胞瘤中的表達(dá)水平高。PCNA在膠質(zhì)瘤組織中高表達(dá)提示膠質(zhì)瘤發(fā)生時神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增殖旺盛。目前，以PCNA作為反映細(xì)胞核增殖的標(biāo)記蛋白，已被應(yīng)用到多種腫瘤增殖性的研究中，本研究也證實PCNA也是腦膠質(zhì)瘤的一個重要的標(biāo)記蛋白。
　　 4Au

11、rora-A、TPX2和PCNA在正常腦組織中不表達(dá)，而在腦膠質(zhì)瘤中呈顯著表達(dá)，尤其在高級別腦膠質(zhì)瘤中更明顯，提示Aurora-A和TPX2與細(xì)胞增殖有密切的關(guān)系，Aurora-A、TPX2之間的相關(guān)分析說明二者在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)存在正相關(guān)。
　　 5通過隨訪證實Aurora-A、TPX2強(qiáng)陽性表達(dá)的患者較二者均陰性或呈弱陽性表達(dá)者生存期明顯縮短，說明二者特異性高表達(dá)可能協(xié)同促進(jìn)膠質(zhì)瘤的發(fā)病和惡性進(jìn)展，與膠質(zhì)瘤的惡性程度和預(yù)