腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)和腸內(nèi)生態(tài)營(yíng)養(yǎng)對(duì)創(chuàng)傷術(shù)后大鼠腸屏障功能及免疫功能的影響.pdf

1、目的：機(jī)體受創(chuàng)傷后會(huì)發(fā)生一系列病理生理和代謝改變，全身處于免疫抑制和腸道粘膜受損狀態(tài)，腸道屏障功能降低，細(xì)菌移位和內(nèi)源性感染增加。給予適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)支持，可降低各種并發(fā)癥的發(fā)生機(jī)率，促進(jìn)患者的盡快恢復(fù)。然而普通的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑尚不能有效地糾正創(chuàng)傷后機(jī)體腸道屏障功能和免疫功能抑制狀態(tài)，因此研究免疫營(yíng)養(yǎng)和生態(tài)營(yíng)養(yǎng)對(duì)創(chuàng)傷后機(jī)體的腸道屏障功能和免疫功能的影響有其重要意義。本實(shí)驗(yàn)對(duì)Wistar大鼠行胃造瘺造模，通過(guò)對(duì)其術(shù)后早期分別給予普通飼料、腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)

2、劑、腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)劑和腸內(nèi)生態(tài)營(yíng)養(yǎng)劑等不同的營(yíng)養(yǎng)方式進(jìn)行喂養(yǎng)，觀察各組大鼠胃造瘺術(shù)后恢復(fù)情況和并發(fā)癥發(fā)生率的差別，并通過(guò)常規(guī)HE染色和免疫組織化學(xué)法觀察各營(yíng)養(yǎng)制劑對(duì)小腸屏障功能的影響，特別是觀察其對(duì)粘膜屏障和免疫屏障的影響，從而為其臨床應(yīng)用提供理論和實(shí)驗(yàn)的依據(jù)。 方法：選取40只清潔級(jí)Wistar大鼠，隨機(jī)分為四組，即對(duì)照組、腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組、腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)組、腸內(nèi)生態(tài)營(yíng)養(yǎng)組，稱(chēng)重后適應(yīng)性飼養(yǎng)2天。通過(guò)無(wú)菌手術(shù)造好Wistar大鼠胃造瘺模

3、型，術(shù)后置于室溫22℃～26℃，濕度40％～70％的安靜、通風(fēng)良好的環(huán)境中單籠飼養(yǎng)，除對(duì)照組給予正規(guī)大鼠專(zhuān)用飼料外，其余腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組、腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)組、腸內(nèi)生態(tài)營(yíng)養(yǎng)組分別給予不同成分的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)劑(等氮等熱量)。腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)劑為瑞素，其中添加精制蛋白粉和葡萄糖，平衡含氮量和熱量；腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)組的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)劑為瑞能，其中添加精氨酸0.625g/100ml；腸內(nèi)生態(tài)營(yíng)養(yǎng)組的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)劑為瑞素，其中添加精制蛋白粉和葡萄糖以及由金雙歧片配置而成的

4、混懸液(現(xiàn)配現(xiàn)用)，劑量為1×108CFU/只·天，并添加精制蛋白粉和葡萄糖平衡含氮量和熱量。按熱量為180kcal/kg·day(746.64kJ/kg·day)標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算出每只大鼠所用相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)劑劑量，術(shù)后第一天給予所用全量的1/2，術(shù)后第二天給予所用全量的2/3，此后每天注入全量。所用營(yíng)養(yǎng)劑分四次每4～6小時(shí)經(jīng)胃造瘺管推注，連續(xù)行腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)7天。期間仔細(xì)觀察各組大鼠注入后反應(yīng)，注意保護(hù)造瘺管，保持造瘺管通暢，并記錄各組大鼠術(shù)后一般情

5、況、術(shù)后并發(fā)癥和腹瀉發(fā)生的情況。喂養(yǎng)7天后予斷頭法處死各組大鼠，立即開(kāi)腹距回盲部5cm處切取3cm長(zhǎng)的末段回腸，置于10％中性甲醛中固定約12小時(shí)，然后常規(guī)石蠟包埋，制成石蠟切片：1、進(jìn)行常規(guī)HE染色觀察各組大鼠小腸粘膜并測(cè)量相關(guān)腸粘膜形態(tài)學(xué)參數(shù)：小腸絨毛高度、腸腺隱窩深度、粘膜厚度以及絨毛表面積。2、用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組大鼠小腸粘膜標(biāo)本中平均每高倍視野IgA+和CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞數(shù)量并進(jìn)行比較。 結(jié)果：1、

6、各組大鼠術(shù)后毛色、活動(dòng)、術(shù)后并發(fā)癥，均以腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組為佳，尤其是腸內(nèi)免疫和生態(tài)營(yíng)養(yǎng)組術(shù)后恢復(fù)更顯良好。由于樣本數(shù)較少，各組術(shù)后感染并發(fā)癥的差異無(wú)顯著性(p＞0.05)，但是各營(yíng)養(yǎng)組特別是腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)組和腸內(nèi)生態(tài)營(yíng)養(yǎng)組較明顯的低于對(duì)照組。 2、腸內(nèi)生態(tài)營(yíng)養(yǎng)組的腹瀉累計(jì)次數(shù)低于腸內(nèi)普通營(yíng)養(yǎng)組、腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)組(p＜0.05)。 3、小腸絨毛高度、腸腺隱窩深度、粘膜厚度以及絨毛表面積等相關(guān)的形態(tài)學(xué)參數(shù)測(cè)量值顯示，各腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組均優(yōu)于

7、對(duì)照組(p＜0.05,p＜0.01)，各腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。 4、對(duì)照組和普通腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組大鼠小腸粘膜IgA+細(xì)胞數(shù)明顯低于腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)組和腸內(nèi)生態(tài)營(yíng)養(yǎng)組(p＜0.05,p＜0.01)。 5、免疫組織化學(xué)方法所測(cè)結(jié)果顯示，對(duì)照組和普通腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組大鼠小腸粘膜CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞數(shù)低于腸內(nèi)免疫營(yíng)養(yǎng)組和生態(tài)營(yíng)養(yǎng)組(p＜0.05,p＜0.01)。 結(jié)論：1、應(yīng)用腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)，特別是腸內(nèi)