G-中藥復(fù)方免疫增強(qiáng)劑中多糖的分離純化與免疫活性研究.pdf

1、多糖的非特異性免疫調(diào)節(jié)作用給近代免疫缺損疾病、腫瘤及艾滋病的治療開辟了新方向。作為免疫增強(qiáng)劑，低毒、無殘留的中藥復(fù)方多糖的研究開發(fā)將具有廣闊的市場(chǎng)前景和良好的社會(huì)意義。本文對(duì)G-中藥復(fù)方免疫增強(qiáng)劑中多糖的提取參數(shù)、分離純化方法及免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了研究，論文主要內(nèi)容如下： 首先以粉碎脫脂的G-中藥復(fù)方為原料，研究了浸提溫度、料液比、浸提時(shí)間和提取次數(shù)對(duì)熱水浸提法提取中藥復(fù)方多糖得率的影響，通過正交實(shí)驗(yàn)確定了水提法提取中藥復(fù)方多糖的

2、最佳提取參數(shù)，即浸提溫度60℃，料液比1：15，浸提時(shí)間4h，提取次數(shù)3次。在上述提取條件下，水提法提取中藥復(fù)方多糖得率可達(dá)到12.65％。 采用多重分析法將中藥復(fù)方多糖與黃芪多糖、復(fù)方水煎劑對(duì)正常小鼠的免疫作用做比較，結(jié)果顯示，中藥復(fù)方多糖的免疫興奮作用最佳，顯著優(yōu)于復(fù)方水煎劑和黃芪多糖，而復(fù)方水煎劑效果略優(yōu)于黃芪多糖，提示中藥復(fù)方多糖是免疫增強(qiáng)劑提高機(jī)體免疫功能的主效成分。 在脫蛋白工藝研究中，比較了Sevag法、木

3、瓜蛋白酶法與木瓜蛋白酶+Sevag法三種脫蛋白方法的效果。蛋白質(zhì)去除率分別為53.7％、43.9％、70.8％；多糖損失率分別為35.8％、3.2％和12.3％。從蛋白去除和多糖提取兩方面綜合考慮，確定木瓜蛋白酶與Sevag法結(jié)合作用為除蛋白最佳工藝。 采用乙醇分級(jí)沉淀、DEAE-纖維素柱層析和TOYOPEAL HW-55F凝膠柱層析分離得到了純白色的GCPS-1A Ⅰ，GCPS-2A Ⅱ及GCPS-3AⅢ，經(jīng)過Sephadex

4、 G-200凝膠柱層析法、紫外分光光度法及紙色譜純度鑒定說明GCPS-1A Ⅰ，GCPS-2A Ⅱ及GCPS-3AⅢ為均一組分。采用TOYOPEA2RLHW-55F凝膠柱層析法測(cè)得三種多糖均一組分的相對(duì)分子質(zhì)量為：GCPS-1A Ⅰ，398107；GCPS-2AⅡ，122138;GCPS-3AⅢ，7951。 考察中藥復(fù)方多糖均一組分GCPS-1A Ⅰ，GCPS-2A Ⅱ及GCPS-3AⅢ對(duì)Cy造成的免疫抑制模型小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用