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1、目的:(1)探討熱休克預(yù)處理(HeatshockPreconditioning,HP)誘導(dǎo)熱休克蛋白70(HeatShockProtein70,HSP70)表達(dá)的規(guī)律。(2)探討脊髓缺血后的再灌注損傷和HSP70表達(dá)的規(guī)律。(3)探討HP對(duì)脊髓缺血再灌注(Ischemia-Reperfusion,IR)損傷的影響及可能機(jī)制,并為治療脊髓IR損傷開辟新思路。 方法:(1)分別建立a.兔脊髓IR損傷模型:夾閉腎下腹主動(dòng)脈25min;
2、b.兔HP模型:整體電熱毯加熱至深部體溫42℃維持15min。(2)新西蘭兔84只隨機(jī)分為5組:①正常對(duì)照(NC)組,6只;②熱休克預(yù)處理(HP)組,6只;③假手術(shù)(S)組,24只;④缺血再灌注(IR)組,24只;⑤熱休克預(yù)處理后缺血再灌注(HP+IR)組,24只,HP后間隔24h行IR操作。(3)NC組和HP組模型制作完畢后2、6、12、24、36、48、72、120及192h抽取血漿。(4)S組、IR組及HP+IR組于再灌注后4、1
3、2、24和48h每組隨機(jī)抽出6只兔,檢測(cè)后肢神經(jīng)功能并處死動(dòng)物取出脊髓。(5)HE染色、SP染色、TUNEL染色觀察脊髓組織病理變化、HSP70表達(dá)及凋亡。(6)脊髓組織及血漿按黃嘌呤氧化酶法測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)活力,硫代巴比妥酸法計(jì)算丙二醛(MDA)含量;Westernblot法檢測(cè)HSP70含量。 結(jié)論:1.熱休克預(yù)處理可誘導(dǎo)HSP70大量表達(dá),在預(yù)處理后24~36hHSP70含量最高。2.脊髓缺血再灌注損傷可誘導(dǎo)HS
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