缺血預(yù)處理對大鼠胰腺移植缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、研究一大鼠胰腸引流式單純胰腺移植模型的建立.目的:建立大鼠胰腸引流式單純胰腺移植的動物模型.方法:10只正常SD大鼠為對照組,22只糖尿病SD大鼠行單純胰腺移植,正常22只SD大鼠為供體;血管吻合采用供胰腺腹主動脈絆(含脾動脈)和門靜脈絆(含脾靜脈)與受體腹主動脈及左腎靜脈分別行端側(cè)和端端吻合(袖套式);外分泌系統(tǒng)采用胰腸引流式.于術(shù)前2 d和術(shù)后1,3,7,14,30 d監(jiān)測受體體重、進(jìn)食量、飲水量和空腹血糖,并分析失敗原因.結(jié)論:成

2、功的單純胰腺移植均可有效地恢復(fù)糖尿病大鼠內(nèi)分泌功能.防治術(shù)后并發(fā)癥是移植成功的關(guān)鍵.研究二缺血預(yù)處理對大鼠移植胰缺血再灌注損傷的早期保護(hù)作用及其與細(xì)胞凋亡的相關(guān)性.目的:探討缺血預(yù)處理對大鼠移植胰缺血再灌注損傷的早期保護(hù)作用及其與細(xì)胞凋亡的相關(guān)性,并分析其中可能的機(jī)制.方法:6只正常大鼠為對照組,24只糖尿病SD大鼠隨機(jī)分為缺血再灌注組(I/R組,n=6)和缺血預(yù)處理組(IPC組,n=18),IPC組又根據(jù)不同方法分為3個亞組:IPC<

3、,1>組(缺血5 min再灌注5 min1次,n=6)、IPC<,2>組(缺血5 min再灌注5 min 2次,n=6)和IPC<,3>組(缺血 5 min再灌注5 min 3次,n=6),I/R組和IPC組均行單純胰腺移植,24只SD大鼠為供體;檢測各組再灌注前、后血糖;再灌注后2 h 血清中TNF-α和NO的含量、移植胰組織中SOD、MPO和MDA含量;用TUNEL法觀察移植胰組織細(xì)胞凋亡情況,Western Blot法檢測移植胰組

4、織Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)情況.結(jié)論:1.缺血預(yù)處理對大鼠移植胰的缺血再灌注損傷具有早期保護(hù)作用,機(jī)制可能是提高SOD的活性、增加內(nèi)源性NO的合成、下調(diào)TNF-α和減輕PMNs粘附與聚集.2.缺血預(yù)處理可以減少移植胰缺血再灌注后的細(xì)胞凋亡,機(jī)制可能是減輕PMNs粘附與聚集、減少氧自由基、上調(diào)Bcl-2蛋白和下調(diào)Bax蛋白.3.缺血 5 min再灌注5min 2次是最佳的大鼠移植胰缺血預(yù)處理誘導(dǎo)辦法.研究三缺血預(yù)處理對大鼠胰腺移植的遠(yuǎn)期

5、影響.目的:探討缺血預(yù)處理對大鼠胰腺移植的遠(yuǎn)期保護(hù)作用.方法:糖尿病大鼠大鼠隨機(jī)分為缺血再灌注組(I/R組,n=30)缺血預(yù)處理組(IPC組,n=30),各組移植前2日、再灌注后3和7日隨機(jī)取6只大鼠殺死取血查血糖及淀粉酶,同時取胰腺組織行H-E染色;6只大鼠用于觀測各種代謝指標(biāo),其余6只大鼠用來觀察大鼠1 mo存活率.結(jié)論:缺血預(yù)處理可增加大鼠胰腺移植的1 mo存活率,降低血淀粉酶活性,并對大鼠胰腺移植具有遠(yuǎn)期保護(hù)作用.研究四大鼠雙后

6、肢缺血預(yù)處理對移植胰缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.目的:探討大鼠雙后肢缺血預(yù)處理對移植胰缺血再灌注損傷的影響及機(jī)制.方法:36只糖尿病SD大鼠隨機(jī)分為缺血再灌注組(I/R組,n=6);缺血預(yù)處理組(IPC組,n=6);缺血預(yù)處理+L-NAME組(IPC+L-NAME組,n=6)和缺血預(yù)處理+DPCPX組(IPC+DPCPX組,n=6);缺血預(yù)處理+納洛酮組(IPC+Nal組,n=6);缺血預(yù)處理+抗壞血酸組(IPC+AA組,n=6).檢測各

7、組再灌注前、后血糖,再灌注后2 h血清中TNF-α、胰腺組織中MPO和MDA含量,并利用TUNEL查移植胰凋亡細(xì)胞.結(jié)論:1.雙后肢缺血預(yù)處理對大鼠移植胰的缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用,機(jī)制可能與NO、氧自由基和阿片樣物質(zhì)有關(guān);2.腺苷可能與大鼠移植胰缺血預(yù)處理的保護(hù)作用無關(guān),阿片樣物質(zhì)介導(dǎo)的保護(hù)作用不是通過減少細(xì)胞凋亡途徑來完成的.研究五缺血預(yù)處理對大鼠胰腺移植受體小腸腸粘膜屏障的影響.目的:探討缺血預(yù)處理對大鼠胰腺移植受體腸粘膜屏障的

8、影響及機(jī)制.方法:12只正常大鼠為對照組,糖尿病大鼠大鼠隨機(jī)分為缺血再灌注組(I/R組,n=12),供體缺血預(yù)處理組(DIPC組,n=12),受體雙后肢缺血預(yù)處理組(RIPC組,n=12),I/R組、DIPC組和RIPC組大鼠均接受胰腺移植,再灌注后5 d檢測小腸通透性和吸收功能,檢測血清TNF-α、NO、SOD和淀粉酶活性,取受體回腸粘膜組織檢測小腸粘膜DNA和蛋白含量、粘膜濕重、微絨毛高度及寬度、MDA含量及MPO活性,同時取腸系膜