豬到人異種心臟移植超急性排斥反應的研究.pdf

1、隨著基礎研究的不斷深入及外科技術的日益完善,器官移植已成為救治多種器官功能衰竭患者生命的首選方法;然而隨著人體器官移植適應癥的增加和移植成功率的提高,器官移植手術數量大幅增加,造成臨床上器官來源呈現(xiàn)嚴重短缺.為了解決這個問題,近年來,異種器官作為緩解人體器官短缺的有效措施之一受到了人們的關注.在異種動物之中,由于豬器官的生理解剖特點及臟器大小與人類十分接近,被認為是異種器官移植的理想供體,但豬→人異種器官移植需要克服的首要免疫學障礙是超

2、急性排斥反應.其發(fā)生的主要機理是人體內預先存在的天然抗體識別豬細胞表面的異種抗原表位-半乳糖α1,3半乳糖(galactose α1,3 galsctose,Gal α 1,3 Gal),從而激活補體而引起血小板聚集,形成血栓,導致移植器官的失功. 水蘇糖是從一種叫做地靈(Stachys floridona)的根莖中提取的α半乳糖苷類非還原性低聚糖,簡單的結構表示為:果糖-葡萄糖-半乳糖-半乳糖(Gal α1,6-Gal α1,6-Gl

3、u β 1,2-Fructose),分子式為C<,24>H<,42>O<,21>,分子量為666.59,無毒,易溶于水.水蘇糖具有α-Gal抗原相似的分子結構,理論上具有抑制超急性排斥反應的作用.本實驗旨在從細胞及器官水平,觀察水蘇糖對豬到人異種心臟移植超急性排斥反應的抑制作用. [方法]: 首先,將傳代培養(yǎng)的豬髖動脈內皮細胞PIEC暴露于人血漿中,同時與水蘇糖或PBS(空白對照)共同孵育后,采用MTT法檢測細胞的存活率

4、,從而觀察水蘇糖對PIEC的保護作用.為觀察對整體器官的效應,我們建立了離體豬心臟體外灌流的超急性排斥反應模型,檢測人血液單獨灌注組及人血液加水蘇糖灌注組心臟組織的病理及其免疫組化(IgG及IgM在組織的沉積)的變化,以觀察水蘇糖對豬到人異種心臟移植超急性排斥反應的抑制作用. [結果]: 1.MTT法檢測水蘇糖處理組的PIEC的相對存活率隨著水蘇糖濃度的增加而升高.說明水蘇糖對PIEC有保護作用. 2.成功地建立

5、了人血液體外灌注豬離,體心臟的超急性排斥反應的模型. 3.灌注豬心臟的存活時間:水蘇糖加人血液灌注組的存活時間明顯長于人血液單獨灌注組.人血液單獨灌注豬心臟的平均存活時間為(9.5±2.5)min,而人血液加水蘇糖灌注豬心臟的平均存活時間為(46.8±8.1)min. 4.灌注豬心臟組織的病理學檢查:水蘇糖加人血液灌注組的豬心臟未發(fā)生超急性排斥反應;而人血液單獨灌注組豬的心臟的心肌間質彌漫性出血、水腫,血管擴張,內皮細胞