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文檔簡介
1、目的:糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是常見的糖尿病慢性微血管并發(fā)癥之一,是糖尿病(diabetes mellitus,DM)的主要死亡原因。本實(shí)驗(yàn)以鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)60mg/kg尾靜脈注射復(fù)制糖尿病大鼠的動物模型,以血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)蒙諾(福辛普利鈉片)為陽性對照藥物,觀察“加味
2、當(dāng)歸芍藥散方”對實(shí)驗(yàn)性糖尿病早期腎損害大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影響,探討“加味當(dāng)歸芍藥散方”對糖尿病大鼠早期腎損害的保護(hù)機(jī)制,從而深化對糖尿病早期腎損害的認(rèn)識,為臨床防治糖尿病腎病的發(fā)生提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和有效的預(yù)防措施,同時也為拓展經(jīng)方的臨床應(yīng)用提供科學(xué)的依據(jù)。 方法:選取160~180g雄性Wistar大鼠60只,排除先天性糖尿病,隨機(jī)抽取12只大鼠列為正常對照組(A組),余下的48只造模,大鼠空
3、腹?fàn)顟B(tài)按照60mg/kg劑量一次性進(jìn)行尾靜脈注射配制好的STZ溶液。造模后第3、7天尾部取血測空腹血糖(FPG),選取FPG>11.1mmol/L且血糖值比較平穩(wěn)的大鼠為DM大鼠,納入實(shí)驗(yàn);在成模的38只大鼠中除去FPG最高的和最低的,將剩下的36只隨機(jī)分為模型組(B組)、中藥組(C組)和西藥組(D組)。中藥組使用“加味當(dāng)歸芍藥散方”水溶劑3ml(劑量為1.80g/kg/d,用生理鹽水配成濃度為0.12g/ml的水溶液)灌胃;西藥組使用
4、蒙諾混懸劑3ml(劑量為1.0mg/kg/d,用濃度為0.2%的羧甲基纖維素鈉配成濃度為0.07mg/ml混懸液)灌胃;正常組和模型組使用同體積生理鹽水灌胃。各組大鼠均自由的飲水和進(jìn)食,每天定時灌胃一次并且每周測各組大鼠的體重一次,以便調(diào)整藥物劑量。4周后,用代謝籠收集24小時尿量,觀察尿量(UV)的變化、24小時尿微量白蛋白(UALB)、β2-微球蛋白(Uβ2-MG);測定每只大鼠體重,非麻醉狀態(tài)下進(jìn)行去眼球取血并處死大鼠,測定血糖(
5、FPG)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、血清丙二醛(MDA)、右腎重量計(jì)算出腎指數(shù)(RI)、血肌酐和尿肌酐并計(jì)算出內(nèi)生肌酐清除率(CCr)。留取腎皮質(zhì)標(biāo)本進(jìn)行光鏡拍照、觀察腎小球、腎小管和基底膜的形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果: 1.對血糖的影響:與正常組比,模型組、中藥組、西藥組血糖水平顯著高于正常組(P<0.01),說明鏈脲佐菌素造糖尿病模犁成功。與模型組比,加味當(dāng)歸芍藥散方從第2周開始有顯著的降低血糖的作用(P<0.01)
6、。 2.對早期腎損傷各實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的影響:與正常組比,模型組uALB、CCr、uβ2-MG顯著升高(P<0.01)。與模型組比,中藥組可顯著降低uALB、uβ2-MG(P<0.01),明顯減低CCr(P<0.05);西藥組顯著減低uALB、uβ2-MG(P<0.01),對CCr無明顯影響(P>0.05)。 3.對體重、尿量及腎指數(shù)的影響:與正常組比較,各組糖尿病大鼠RI和尿量均顯著增高而體重顯著下降(P<0.01),尤其是
7、模型組大鼠;與模型組比,中藥組和西藥組均能明顯降低RI和尿量(P<0.01),而體重中藥組從2W,西藥組從3W有顯著的增加(P<0.01);而中西藥組相比,第4W中藥組的體重顯著高于西藥(P<0.05)。 4.對血清SOD的影響:與正常組比,模型組SOD的含量顯著降低(P<0.01);與模型組比較,中藥組血清SOD可顯著增高(P<0.01),西藥組增高無顯著性差異(P>0.05)。 5.對血清丙二醛(MDA)的影響:與正
8、常組比,模型組血清MDA含量顯著升高(P<0.01);與模型組比較,中藥組血清MDA顯著降低(P<0.01),西藥組血清MDA降低(P<0.05)。 6.病理結(jié)果:正常對照組大鼠未見明顯腎小球、腎小管及間質(zhì)病變。DM組多數(shù)腎小球明顯增大,腫脹,充血,腎小囊變窄,基底膜增厚,腎小球系膜區(qū)增寬,少數(shù)腎小球出現(xiàn)輕度硬化;部分腎小管出現(xiàn)細(xì)胞大、空泡變性,管腔變窄;腎間質(zhì)部分小血管玻璃樣變性。藥物干預(yù)組的改變較輕,以中藥組為最輕。
9、 結(jié)論: 1.尾靜脈注射STZ復(fù)制成DM的模型后四周,模型組糖尿病大鼠都出現(xiàn)了腎臟的損害。 2.“加味當(dāng)歸芍藥散方”可以降低DM大鼠的血糖,改善一般癥狀,降低腎指數(shù),減少尿量,增加體重,提高內(nèi)生肌酐清除率,降低尿微量白蛋白和β2-微球蛋白的排泄,從而改善腎功能,防治糖尿病腎臟的早期損害。 3.“加味當(dāng)歸芍藥散方”可升高DM大鼠血清SOD的含量而降低血清MDA的含量,減少高血糖引起自由基的生成和動脈硬化的發(fā)生,發(fā)揮
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