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1、目的:以半夏白術(shù)天麻湯為例,初步探討中藥復(fù)方藥效物質(zhì)用“半仿生-生物酶法(SBEE法)”研究的基本模式。
方法:以天麻素、甘草次酸、分子量≤1000提取物、HPLC總面積、總多糖、干浸膏等為指標(biāo),在藥材粒度、提取溫度、提取用水量、濾過(guò)、濃縮等條件相同的前提下,首先用正交設(shè)計(jì)優(yōu)選出SBEE法提取用水的pH值、提取時(shí)間、溫度及加入酶量;再以上述指標(biāo),對(duì)該方中6味藥材的15種組合方式進(jìn)行優(yōu)選;然后采用此方藥最佳組合方式提取,用均勻設(shè)
2、計(jì)優(yōu)選出SBE法提取用水的pH值和提取時(shí)間;并用比例分割法優(yōu)選出醇提法(AE法)較佳醇提濃度;在此基礎(chǔ)上作SBEE法、SBE法、WE法(水提法)、AE法4種方法提取液的成分比較。
結(jié)果:半夏白術(shù)天麻湯方藥用SBEE法提取條件為:將方藥先用2%酶Ⅰ(以飲片重量計(jì))預(yù)處理12h;提取3次,第一次加入0.5%酶Ⅲ,第三次加入1%酶Ⅳ;水的pH值依次為:2.0、6.5、9.0,提取時(shí)間依次為:60min、30 min、30min,提取
3、溫度為:61±1℃,以半夏與天麻、茯苓與橘紅、白術(shù)與甘草分別提取,再將3種提取液合并為佳;SBE法的工藝條件為:3煎用水的pH值依次為4.0、6.5、8.0,煎煮的時(shí)間依次為120min、90min、90min;醇提法的最佳乙醇濃度為30%。方藥4種方法提取液的成分綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)Y值的大小順序?yàn)?YSBEE>YSBE>>YWE>YAE。
結(jié)論:半夏白術(shù)天麻湯方藥成分提取以SBEE法為佳。本文建立的“SBEE法研究模式”科學(xué)合理,
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