軟脂酸對(duì)胰島細(xì)胞凋亡及機(jī)制的研究.pdf

1、目的：探討不同濃度軟脂酸對(duì)胰島細(xì)胞凋亡及胰島素釋放的影響　　方法：膠原酶P消化，F(xiàn)icoll400純化的成年SD大鼠胰島細(xì)胞經(jīng)RPMI1640培養(yǎng)7天后，鋪成單層，用不同濃度軟脂酸(分別為0、0.125、0.25、0.5mmol/L)共同孵育48h，分別用含葡萄糖2.8mmol/L和28mmol/L的KRBB孵育1小時(shí)后用放免法測(cè)定胰島素含量。AO/EB染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化，用Tunel法及流式細(xì)胞術(shù)計(jì)算胰島細(xì)胞凋亡率。　　結(jié)果：在

2、低濃度(2.8mmol/L)葡萄糖刺激下，各濃度軟脂酸組的胰島素分泌量與對(duì)照組相比無顯著性差異(P＞0.05)。高糖(28mmol/L)刺激下各處理組的胰島素分泌較對(duì)照組明顯減少(P＜0.05)。各種濃度軟脂酸均能促進(jìn)胰島細(xì)胞凋亡?！　〗Y(jié)論：軟脂酸對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下(2.8mmol/L葡萄糖)的胰島素分泌無明顯影響，但可抑制高糖狀態(tài)下(28mmol/L葡萄糖)的胰島素分泌，且可誘導(dǎo)胰島細(xì)胞凋亡?！　∧康?探討軟脂酸介導(dǎo)的胰島細(xì)胞凋亡過程中

3、細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)堆積、NO生成及Bax蛋白、Bcl-2蛋白的表達(dá)?！　》椒?膠原酶P消化，F(xiàn)icoll400純化的成年SD大鼠胰島細(xì)胞經(jīng)RPMI1640培養(yǎng)7天后，鋪成單層，用不同濃度軟脂酸(分別為0、0.125、0.25、0.5mmol/L)共同孵育48h，用油紅染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)堆積。用硝酸還原酶法分別測(cè)定培養(yǎng)0小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)后培養(yǎng)液上清NO的濃度，應(yīng)用免疫組化技術(shù)、免疫熒光技術(shù)及流式細(xì)胞儀檢測(cè)胰島細(xì)胞Bcl-2及Bax蛋白的

4、表達(dá)?！　〗Y(jié)果:油紅染色見軟脂酸處理組胰島細(xì)胞內(nèi)均有脂質(zhì)堆積，尤以高濃度組明顯；不同濃度軟脂酸處理均能使胰島細(xì)胞合成NO增加，24小時(shí)，48小時(shí)與A組比較，差異有顯著性(P＜0.05)；免疫組化法顯示：對(duì)照組Bax蛋白表達(dá)陰性，Bcl-2蛋白表達(dá)陽性，0.125mmol/L軟脂酸處理組，Bax蛋白表達(dá)弱陽性，Bcl-2蛋白表達(dá)陽性，0.25mmol/L及0.5mmol/L軟脂酸處理組Bax蛋白表達(dá)陽性，Bcl-2蛋白陰性。FITC間接