鯽魚PKR-like Zα結(jié)構(gòu)域結(jié)合核酸的分析.pdf

1、摘要摘 要螂 魚P K R 基因 ( C a P K R - I i k e ) 是 魚 類 第 一 個(gè)、 也 是 非 哺 乳 類 脊 椎 動(dòng) 物 第 一 個(gè) 報(bào)道的 P K R同 源物。 該 基因編碼的蛋白N - 端沒(méi)有典型的d s R B M 區(qū)域，取而代之的是兩個(gè)Z - D N A結(jié) 合區(qū) 域( Z a i 和L a g ) . 所以， C a P K R - l i k e 是Z a 蛋白 家族成員。C a P K R - l

2、i k e可能同時(shí)具有哺乳動(dòng)物類干擾素系統(tǒng)中兩種重要效應(yīng)蛋白 A D A R 1和P K R結(jié)構(gòu)特征。 故而對(duì)L a 結(jié)構(gòu)的研究有助于 豐富對(duì)魚類細(xì)胞的抗病毒免疫反應(yīng)過(guò)程和機(jī)制的認(rèn)識(shí)。本文在前期工作基礎(chǔ)上， 將從S M A R T - c D N A文庫(kù)中克隆得到的C a P K R - T i k eL a i I L a g 及Z a l Z a 2 結(jié) 構(gòu) 域c D N A 重 組至 載 體中 ， 原 核 表 達(dá)三 種融 合多

3、膚 少 z a 1 ,P z r } 及P z a l z Q a ) a 親 和層 析純化表達(dá)產(chǎn)物， 得到Z a p i m l ; x e e 凝膠阻 滯實(shí)驗(yàn)分 析表達(dá)Z d P K R - t i k e 與P o l y 1 : C , 蛙r m D N A , 重組 質(zhì)粒d ( C G ) 1 3 , d ( C G ) 1 3 的 親和 性。 結(jié) 果 表明 ， P z Q 1 , P z c a 及二 者的 混 合物

4、 均 不能 與 雙 鏈R N A ( P o l y I : C ) 和 蛙 精D N A 及d ( C G ) 1 3結(jié) 合。 而P z d l z o 2 與P o l y I : C 和 鮮 精D N A及d ( C G ) 1 3 有明 顯的 結(jié) 合， 而 且 隨氣: 二濃度的 增加， P o l y I : C . 魷 精D N A , 重組 質(zhì)粒d ( C G ) 1 3 和d ( C G ) ” 在瓊脂 糖 凝膠電泳

5、中的阻滯作用越明顯。關(guān)鍵詞:卿魚: P K R - l i k e ; L a P K R d i k e ;親和性:核酸獨(dú) 創(chuàng) 性 聲 明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明 所呈交的 學(xué)位論 文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的 研究工作及取得的研 究成果。 據(jù)我所知， 除了文中 特別加以 標(biāo)注和致謝的 地方外， 論文中 不包含其他 人已 經(jīng)發(fā) 表或 撰 寫 過(guò) 的 研 究 成 果 ， 也 不 包 含為 獲得 」通左 或 其 他 教 育 機(jī) 構(gòu)的學(xué)位或證書而使

6、用過(guò)的材料。 與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué) 位 論 文 作 者 簽 名 : 4 A - - 簽 字 F i M : a } I 年 ‘ 月 樸學(xué)位論文版 權(quán)使用授權(quán)書本 學(xué) 位論 文 作 者 完 全了 解 一 魚 立鑫 遭 ‘有 關(guān) 保留 、 使 用 學(xué) 位 論 文 的 規(guī) 定，有權(quán)保留 并向國(guó)家有關(guān)部門 或 機(jī)構(gòu) 送交論文的復(fù)印件和磁 盤， 允許論文被查閱 和借閱。 本人 授權(quán)南