MICA功能性結(jié)構(gòu)域的研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文MICA功能性結(jié)構(gòu)域的研究姓名：黃杰申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：何維崔蓮仙20040601中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文HeLa細(xì)胞表面的MICA分子天然構(gòu)象?？筂ICA抗體的獲得為進一步的研究提供了有力的工具。與此同時，組織免疫組化實驗首次證明卵巢癌腫瘤細(xì)胞中有MICA的高表達，而正常卵巢組織細(xì)胞中未見有MICA的表達。此外，本論文也首次報道了在卵巢癌組織切片中有V61型y3T淋巴細(xì)胞的分布，而在

2、正常卵巢組織中未發(fā)現(xiàn)有V6l型78T淋巴細(xì)胞的分布。最后，對MICA分子的功能進行了初步的研究。在本論文中，我們使用已知表達MICA008的腫瘤細(xì)胞HeLa細(xì)胞作為細(xì)胞毒活性檢測的靶細(xì)胞，比較了體外擴增的外周血yST細(xì)胞(絕大部分亞型為V79／V62)和V61y6TILs與MICA的結(jié)合功能。實驗結(jié)果表明，來源于外周血Vy9／V6276T細(xì)胞和來源于腫瘤組織的VSl7fiTILs均能裂解HeLa細(xì)胞，但V6176TILs的殺傷作用能被抗

3、一MICA抗體所阻斷，而V79／V62Y6T細(xì)胞的殺傷作用不能被抗MICA抗體所阻斷。體外擴增的兩種Y6T細(xì)胞表面均具有NKG2D分子，推測上述抗體封閉結(jié)果不同是由于兩者表達TCR有別，此結(jié)果從另一個方面說明了雙信號理論，即MICA與VSl倆T細(xì)胞TCR結(jié)合提供第一信號，MICA和NKG2D結(jié)合提供第二信號。而在vr9／V6276T細(xì)胞的殺傷作用中，仍舊存在MICA和NKG2D結(jié)合提供第二信號，而其第一信號則可能是由TCR與腫瘤細(xì)胞表面

4、的其他分子結(jié)合形成。因而，其殺傷活性不能被抗MICA單抗所改變。本研究的另一個創(chuàng)新點在于闡明了MICA的功能性結(jié)構(gòu)域為胞外的n12結(jié)構(gòu)域，在加抗體封閉中，針對a2結(jié)構(gòu)域的抗體10C6具有更好的阻斷作用，這可能進一步說明a2結(jié)構(gòu)域在MICA蛋白和其配體結(jié)合中發(fā)揮著更為關(guān)鍵的作用。從上述結(jié)果得到的初步結(jié)論是：1、在卵巢癌組織切片中有VSl型yST淋巴細(xì)胞的分布，而在正常卵巢組織中未發(fā)現(xiàn)有V61型忙T淋巴細(xì)胞的分布，同時，卵巢癌腫瘤細(xì)胞中有M