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文檔簡介
1、近年來,結腸癌的發(fā)病率呈逐年升高趨勢,是我國常見惡性腫瘤之一,嚴重危害人類健康。臨床對結腸癌的治療仍以手術、化療及其他輔助治療為主。術后化療毒副作用較多,對人體帶來一定的損傷。芹菜素(apigenin,API)是一種黃酮類化合物,大量存在于水果、蔬菜、豆類、茶葉中。研究發(fā)現(xiàn)芹菜素具有抗癌、降壓、降血脂、擴血管、抗炎等作用。關于芹菜素抗消化道腫瘤的研究,特別是對結腸癌的研究少見報道,其殺傷結腸癌等癌細胞的作用機制尚未明確。本研究主要以人結
2、腸癌HCT-8細胞為研究對象,觀察芹菜素對HCT-8細胞的生長抑制和誘導凋亡的作用,并對芹菜素殺傷人結腸癌HCT-8細胞的作用機制進行初步探討。
為初步觀察芹菜素對結腸癌細胞有無生長抑制作用,本實驗首先采用MTT法觀察芹菜素對結腸癌細胞生長和增殖的影響,實驗分陰性對照組、5μg·ml-1芹菜素組、10μg·ml-1芹菜素組、15μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組,分別作用24h、48h、72h;采用了DNA凝膠
3、電泳觀察不同濃度(5μg·ml-1芹菜素組、10μg·ml-1芹菜素組、15μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組和陰性對照組)對HCT-8的細胞的誘導凋亡情況;還采用流式細胞術檢測不同濃度芹菜素(10μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組)誘導HCT-8的細胞早期凋亡情況。同時對不同濃度芹菜素(5μg·ml-1、10μg·ml-1、15μg·ml-1、20μg·ml-1)做用于HCT-8的細胞后Caspase-
4、3、Caspase-6酶活性進行了檢測。
實驗發(fā)現(xiàn),隨著芹菜素濃度(5μg·ml-1、10μg·ml-1、15μg·ml-1、20μg·ml-1)的增加,細胞凋亡率逐漸增高且呈一定的量效關系;5μg·ml-1芹菜素組、10μg·ml-1芹菜素組、15μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組作用于HCT-8細胞48小時檢測到DNA Ladder,用藥組梯狀條帶的亮度明顯亮于對照組,且與藥物劑量正相關;流式細胞術檢測10
5、μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組,作用24小時細胞凋亡率分別為(19.16±0.14)%及(26.67±0.13)%;Caspase-3、Caspase-6酶活性顯著增強。
綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)芹菜素對人結腸癌HCT-8細胞有抑制其生長、誘導其凋亡的作用。Caspase-3及 Caspase-6酶活性有顯著增加,芹菜素的誘導結腸癌細胞凋亡作用可能是通過此途徑來完成的。但芹菜素抑制人結腸癌HCT-8細胞增殖是否
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