混合花粉授粉茶樹雜交F-,1-代AFLP分析及優(yōu)株選擇.pdf

1、該項目選擇以國家級茶樹良種櫧葉齊、福鼎大白茶、白毫早、龍井43為父本，省級茶樹良種湘波綠為母本，1980年取父本花粉等量混合雜交授粉所獲得的F<,1>代79個單株為實驗材料，應用AFLP分子標記技術(shù)和茶樹育種中常用的優(yōu)株選擇方法對其進行了研究，得到以下主要研究結(jié)果： 1.本項研究通過AFLP分子標記技術(shù)聚類分析對其F<,1>代各單株的父本進行了初步鑒定認為：使用AFLP分子標記方法多態(tài)性高、重復性好，使用EO/MO預擴、5對選擴

2、引物(E41/M42，E41/M55，E42/M34，E43/M42，E44/M33)可以將混合花粉授粉茶樹雜交F<,1>代79個單株區(qū)分開來，是適用于混合花粉授粉茶樹雜交后代親子鑒定的方法。 2.采用數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析軟件DPS2000中的UPGMA法對實驗數(shù)據(jù)進行聚類分析，得到了根據(jù)遺傳距離建立的聚類圖。在遺傳距離為0.76處取結(jié)合線，可將所有材料分為4個類組，認為父本為櫧葉齊的有37個單株：8、9、11、12、13、15、16、

3、19、21、25、27、28、30、39、40、41、43、44、47、49、50、54、55、56、57、61、65、66、67、69、70、71、72、75、77、78、79號。父本為龍井43的單株有15個：2、4、7、14、17、23、26、29、32、36、60、62、63、64、73號。父本是福鼎大白茶的有15個單株：1、3、10、18、22、24、31、38、45、46、48、59、68、74、76號。父本為白毫早的最少，有

4、12個單株：5、6、20、33、34、35、37、42、51、52、53、58號。為混合花粉授粉茶樹雜交后代進行品種比較實驗時對照父本品種的確定提供了確切的依據(jù)和方法。 3.AFLP聚類分析結(jié)果將混合花粉授粉茶樹雜交的4個父本完全分開，其F<,1>代79個單株分別歸于4個父本所在的類群里，其中龍井43與湘波綠出現(xiàn)的總條帶數(shù)為395條，其F<,1>代15個單株出現(xiàn)與父母本相異的條帶數(shù)最多的達到19條，最少的僅有5條，F(xiàn)<,1>群體

5、與父母本總的相異條帶數(shù)為41條，即該組合雙親的AFLP譜帶在其F<,1>代中的總表現(xiàn)率為89.62％，其它組合及后代有類似表現(xiàn)，這既說明各單株是其親本的真正后代，同時又表明混合花粉授粉茶樹雜交F<,1>代較單一父本雜交的分離度更大，產(chǎn)生新的變異類型更多。 4.AFLP聚類分析結(jié)果表明，混合授粉法確實可以提高雜交的可孕性，改變親本間的親和力，為品種與種質(zhì)創(chuàng)新提供了更多可能途徑。根據(jù)雜交檔案記載，本實驗材料的結(jié)實率為28.8％，高于

6、各父本分別雜交的結(jié)實率，證明混合授粉法可提高雜交的可孕性，相應提高選種效率。母本湘波綠與父本中的櫧葉齊、白毫早都來源于安化群體，其親緣關(guān)系近，在非混合花粉授粉時雜交親和力是不高的，但本實驗AFLP聚類分析表明，以與母本親緣關(guān)系近的櫧葉齊為父本的單株數(shù)最多，達37個，占總單株數(shù)的46.8％，顯著高于親緣關(guān)系遠的龍井43和福鼎大白茶(均為19.0％)，櫧葉齊成為該雜交組合中的優(yōu)勢父本。這種變化可供今后進行混合花粉授粉雜交親本選配時參考。

7、 5.根據(jù)已有的早期單株鑒定及遺傳研究成果，對這一雜交組合選擇生長勢、分枝角度、營養(yǎng)芽物候期、成熟葉片及芽葉特征等形態(tài)特征，茶多酚、氨基酸、水浸出物含量等生化成分進行了較系統(tǒng)的比較分析，結(jié)合所得的AFLP分析結(jié)果進行了優(yōu)株選拔，確定了14個優(yōu)株進入下一步試驗：2，4，6，9，11，13，18，19，29，51，62，70，73，74。這其中父本為櫧葉齊的第13號單株的多項指標均優(yōu)于其它單株，甚至有超雙親優(yōu)勢，說明櫧葉齊等與湘波綠親緣