硬膜外腔藥物注射對(duì)SD大鼠腎上腺皮質(zhì)功能、股骨頭及腰椎神經(jīng)的影響.pdf

1、目的:
　　 骶管注射療法安全、快速、有效，廣泛用于腰骶椎管內(nèi)病變的治療，但臨床用藥沒(méi)有統(tǒng)一規(guī)范，在用藥種類(lèi)、用藥配伍、PH、用藥劑量及注射速度等方面存在很大差異。骶管注射療法的并發(fā)癥低血壓、感染、過(guò)敏、月經(jīng)紊亂、短暫性失明、截癱、神經(jīng)根損傷、甚至死亡等時(shí)有報(bào)道，臨床隨意的配方用藥是發(fā)生并發(fā)癥的主要原因。應(yīng)該對(duì)該療法眾多配方的安全性進(jìn)行研究，篩選出最佳配方，以使骶管注射療法療效最優(yōu)，并發(fā)癥最低。預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇臨床常用12組藥物配伍，

2、分別行SD大鼠硬膜外腔藥物注射，處死后顯微鏡下觀(guān)察大鼠腎上腺、股骨頭及腰椎神經(jīng)的病理改變，篩選出病理變化最大組。正式實(shí)驗(yàn)選擇預(yù)實(shí)驗(yàn)病理變化最大組，細(xì)分為6組，分別行SD大鼠硬膜外腔藥物注射，測(cè)量血清皮質(zhì)醇變化，處死后顯微鏡下觀(guān)察腎上腺、股骨頭及腰椎神經(jīng)形態(tài)學(xué)改變，以分析該組各藥物對(duì)大鼠的影響。
　　 方法:
　　 預(yù)實(shí)驗(yàn)選取臨床常用醋酸曲安奈德、地塞米松、醋酸潑尼松龍、丹參注射液、維生素B1、維生素B12等藥物，按不同配

3、伍分為12組:組1:2％利多卡因+生理鹽水;組2:組1+維生素B1+維生素B12;組3:地塞米松注射液+組1;組4:地塞米松注射液+組2;組5:醋酸曲安奈德注射液+組1;組6:醋酸曲安奈德注射液+組2;組7:醋酸潑尼松龍注射液+組1;組8:醋酸潑尼松龍注射液+組2;組9:丹參注射液+組1;組10:丹參注射液+組2:組11:地塞米松注射液+丹參注射液+組2;組12:醋酸曲安奈德注射液+丹參注射液+組2。按醋酸曲安奈德注射液20mg、地塞米

4、松注射液25mg、醋酸潑尼松龍注射液80mg,丹參注射液8ml、2％利多卡因5ml、維生素B1100mg,維生素B121mg，每組均加生理鹽水致30ml的比例配伍。所有配伍統(tǒng)一采用0.2ml/只/次注射用量。分別對(duì)26只雄性SD大鼠進(jìn)行L5-6椎間隙硬膜外腔藥物注射，每周1次，連續(xù)注射3周，第4周統(tǒng)一處死，取腎上腺、股骨頭、腰椎，行H-E染色，顯微鏡下觀(guān)察。
　　 正式實(shí)驗(yàn)選取預(yù)實(shí)驗(yàn)第6組，將其細(xì)分為6組:組1:利多卡因、維生素

5、B1、維生素B12、生理鹽水;組2:組1加醋酸曲安奈德;組3:組2減維生素B12;組4:組2減維生素B1;組5:組2減維生素B12、維生素B1。組6為空白組。雄性SD大鼠72只隨機(jī)分為6組，每組12只。行SD大鼠L5-6椎間隙硬膜外腔注藥，按醋酸曲安奈德20mg、2％利多卡因5ml、維生素B1100mg,維生素B121mg，每組均加生理鹽水至30ml的比例配伍。所有配伍統(tǒng)一采用0.2ml/只/次注射用量。每周1次，連續(xù)注射3周，第4周測(cè)

6、血清皮質(zhì)醇濃度，并隨機(jī)抽取4只大鼠處死，取腎上腺、股骨頭、腰椎神經(jīng)，行H-E染色，顯微鏡下觀(guān)察。
　　 結(jié)果:
　　 1.預(yù)實(shí)驗(yàn)
　　 1.1.存活情況:
　　 第2次注藥后3天，組5死亡1只、組6死亡2只大鼠;注藥后第5天，組6又死亡1只;第3次注藥后1日，組4死亡1只;注藥后2日，組3死亡1只;注藥后6日，組12死亡2只。剩余大鼠大多體毛不光澤，肌肉消瘦，興奮性較低，部份大鼠食欲不振，形色萎靡。

7、>　　 1.2.切片觀(guān)察:
　　 第1組大鼠腎上腺皮質(zhì)束狀帶與網(wǎng)狀帶寬度比（束網(wǎng)比）約為2:1，各帶界限清晰，高倍鏡下觀(guān)察各層細(xì)胞排列規(guī)則，僅見(jiàn)少量細(xì)胞核固縮、碎裂、溶解;股骨頭骨小梁完整無(wú)斷裂，少量脂肪細(xì)胞存在，營(yíng)養(yǎng)血管豐富;腰椎神經(jīng):雪旺細(xì)胞均勻排列，髓鞘無(wú)腫脹。
　　 第2組大鼠腎上腺皮質(zhì)束網(wǎng)比約為2.5:1，余同1組;骨股頭觀(guān)察結(jié)果同第1組;腰椎神經(jīng)偶見(jiàn)髓鞘腫脹，余同第1組。
　　 第5組腎上腺偏小，束

8、網(wǎng)比為1～1.5:1，束狀帶最窄處約等于球狀帶，束網(wǎng)邊界不清晰，束狀帶細(xì)胞大量水腫，核固縮、碎裂、溶解;股骨頭骨小梁變疏變細(xì)、偶有斷裂，大量脂肪細(xì)胞存在，血供稍減少;腰椎神經(jīng)較多髓鞘腫脹、雪旺細(xì)胞壞死。
　　 第7組腎上腺、股骨頭、腰椎神經(jīng)觀(guān)察結(jié)果同第1組。
　　 第8組腎上腺、腰椎神經(jīng)觀(guān)察結(jié)果同第1組;股骨頭有較多脂肪細(xì)胞存在，骨小梁變細(xì)，有斷裂。
　　 第9組腎上腺、骨股頭觀(guān)察結(jié)果同1組;腰椎神經(jīng)偶見(jiàn)雪旺細(xì)胞

9、核變大，余同第1組。
　　 第10組腎上腺觀(guān)察結(jié)果同1;股骨頭較多脂肪細(xì)胞存在，骨小梁變細(xì)，有斷裂;腰椎神經(jīng)觀(guān)察結(jié)果同第9組。
　　 第11組腎上腺體積較大，束網(wǎng)帶界限不清較重，余同1;股骨頭有較多脂肪細(xì)胞存在，骨小梁排列紊亂，骨小梁變疏變細(xì)，有斷裂，營(yíng)養(yǎng)血管較少;腰椎神經(jīng)血管較少，較多髓鞘腫脹。
　　 第12組腎上腺明顯變小，束網(wǎng)界限嚴(yán)重不清淅，束狀帶很窄，部份區(qū)域幾乎沒(méi)有，束狀帶大量細(xì)胞核固縮、碎裂、溶解;骨

10、小梁同11組;腰椎神經(jīng)很少血管，大量髓鞘腫脹。
　　 第3、4、6組大鼠過(guò)早死亡，無(wú)切片觀(guān)察記錄。
　　 2.正式實(shí)驗(yàn)
　　 2.1.存活情況:注藥后第1周，第5組有3只大鼠先后死亡，尸檢見(jiàn):雙肺鮮紅，下腔靜脈右心房入口處充血腫大如心臟大小;注藥后第2周，第4組有3、5號(hào)大鼠死亡。3號(hào)尸檢見(jiàn):腹部膨脹，大腸腫脹明顯，內(nèi)含大量氣體。胃脹明顯。肝心淤黑，肺腥紅。5號(hào)尸檢見(jiàn):腎臟淤黑，胃腸有脹氣。肝有淤斑，心肺淤黑。第

11、3組，第5組亦有2只大鼠萎靡;注藥后第3周，第2組有2只，第3組有1只大鼠死亡，尸檢見(jiàn):腹部明顯腫脹，較多腹水，胃及大腸腫脹明顯并充滿(mǎn)氣體，肝、肺、心淤黑，下腔靜脈入心處脹大。
　　 2.2.外觀(guān)及活動(dòng):第1組、6組:食欲旺盛，眼睛有神、反應(yīng)敏捷，體毛光滑，肌肉平滿(mǎn)、活動(dòng)有力，身無(wú)傷痕，尾不彎曲，天然孔腔無(wú)分泌物，無(wú)畸形，糞便黑色呈麥粒狀;第2、3、4、5組:體毛不光澤，肌肉消瘦，興奮性較低，部分大鼠食欲不振，形色萎靡。

12、　　 2.3.解剖學(xué)觀(guān)察:第2、3、4、5、組:部份大鼠心、肺、肝臟淤血，下腔靜脈近心房部腫大;胃腸脹氣，腹水增多;腎上腺變小。
　　 2.4.血清皮質(zhì)醇含量:醋酸曲安奈德組、維生素B12組與其余組相比有顯著性差異(P＜0.05);
　　 2.5.切片光鏡下觀(guān)察
　　 2.5.1.腎上腺
　　 第6組:腎上腺皮質(zhì)束網(wǎng)比約為1.77:1，各帶界限清晰，高倍鏡下觀(guān)察各層細(xì)胞排列規(guī)則，偶見(jiàn)束狀帶細(xì)胞核固縮、細(xì)

13、胞凋亡。
　　 第1組:腎上腺皮質(zhì)束網(wǎng)比約為1.27:1。各帶界限較清晰，高倍鏡下觀(guān)察各層細(xì)胞排列規(guī)則，少量細(xì)胞核固縮或破裂、溶解。
　　 第2組:多數(shù)腎上腺明顯減小，束網(wǎng)比約為0.56:1。束網(wǎng)邊界不清晰，最窄處束狀帶幾乎沒(méi)有。大量束狀帶細(xì)胞腫脹，細(xì)胞核固縮、破裂、溶解。
　　 第3、4組:束網(wǎng)比分別約為0.57:1、0.59:1，觀(guān)察結(jié)果基本同第2組。
　　 第5組:腎上腺未明顯偏小，束網(wǎng)比約為1.0

14、2:1。束網(wǎng)邊界不清晰，較多束狀帶細(xì)胞腫脹，細(xì)胞核固縮、破裂、溶解。
　　 2.5.2.股骨頭
　　 第6組:幾乎無(wú)脂肪細(xì)胞，營(yíng)養(yǎng)血管豐富，骨小梁排列規(guī)則、無(wú)斷裂，骨細(xì)胞正常。
　　 第1組:基本同第6組。
　　 第2組:大量脂肪細(xì)胞存在，營(yíng)養(yǎng)血管變細(xì)減少，骨小梁變疏變細(xì)、偶有斷裂，部分骨細(xì)胞腫脹，細(xì)胞核破裂、溶解。
　　 第3組:較多脂肪細(xì)胞存在（較第2組少），營(yíng)養(yǎng)血管變細(xì)減少（較第2組稍輕），

15、骨小梁變疏變細(xì)、偶有斷裂，部分骨細(xì)胞腫脹，細(xì)胞核破裂、溶解。
　　 第4組:基本同第3組。
　　 第5組:稀疏脂肪細(xì)胞存在（較第3、4組少），營(yíng)養(yǎng)血管未明顯減少，骨小梁變疏、偶有斷裂，偶有骨細(xì)胞腫脹，細(xì)胞核破裂、溶解。
　　 2.5.3.腰椎神經(jīng)
　　 第1、6組血管較多，雪旺細(xì)胞均勻分部，偶見(jiàn)髓鞘水腫。第2、3、4組雪旺細(xì)胞分部較稀，部分軸突消失、髓鞘水腫。第5組雪旺細(xì)胞分部較稀且明顯混亂，較多軸突消失

16、及髓鞘水腫。
　　 結(jié)論:
　　 1.預(yù)實(shí)驗(yàn)
　　 長(zhǎng)效糖皮質(zhì)激素醋酸曲安奈德組5、組6大鼠腎上腺、股骨頭病理變化較大，部分腰椎神經(jīng)亦有損傷。
　　 丹參注射液配伍水溶性糖皮質(zhì)激素地塞米松組11及配伍懸濁液糖皮質(zhì)激素醋酸曲安奈德組12均有腎上腺、股骨頭顯著病理改變及部分腰椎神經(jīng)損傷。
　　 單純醋酸潑尼松龍注射液組7病理改變輕微。
　　 醋酸潑尼松龍注射液配伍維生素組8病理改變不明顯但較組

17、7嚴(yán)重。
　　 單純的丹參注射液組9病理改變不明顯。
　　 丹參注射液配維生素組10病理改變不明顯但較組9嚴(yán)重。
　　 2.正式實(shí)驗(yàn)
　　 維生素B1、B12單獨(dú)應(yīng)用于硬膜外腔注射未引起明顯的病理變化。
　　 醋酸曲安奈德硬膜外腔注射可明顯降低大鼠血清皮質(zhì)醇含量，與維生素B12合用更會(huì)加重皮質(zhì)醇的降低，而維生素B1則有一定的抑制作用。
　　 醋酸曲安奈德硬膜外腔注射可引起SD大鼠繼發(fā)性腎上