鹽脅迫下不同鹽敏感型番茄蛋白質(zhì)組分析.pdf

1、以兩種野生番茄秘魯番茄(Lycopersicon peruvianum LA111)、潘那利番茄(Lycopersicon pennellii LA716)和栽培番茄“鮮豐98-7” (Lycopersicon esculentum Mill ‘XF 98-7’)為材料進(jìn)行蛋白質(zhì)組分析。番茄幼苗生長(zhǎng)至“兩葉一心”時(shí)用150mM NaCl脅迫，14天后用TCA丙酮法提取葉片總蛋白，經(jīng)過裂解、水化、等電聚焦、平衡、SDS-PAGE電泳和考馬

2、斯亮藍(lán)膠體染色等一系列步驟后，獲得雙向電泳凝膠圖。經(jīng)ImageMaster 2D patinum軟件分析，匹配率均達(dá)90％以上，圖像分辨率也超過800個(gè)蛋白斑點(diǎn)。軟件分析和肉眼觀察表明，秘魯番茄、潘那利番茄、鮮豐番茄分別有16、15、28個(gè)蛋白為上調(diào)蛋白，11、18、17個(gè)蛋白為下調(diào)蛋白。選取其中差異最顯著的20個(gè)蛋白點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF分析和數(shù)據(jù)檢索，其中17個(gè)蛋白得到了有效的搜庫(kù)結(jié)果。 結(jié)果表明，在秘魯番茄中，碳酸酐酶

3、、蘇氨酸脫水酶、鐵氧還蛋白-NADP+還原酶表達(dá)下調(diào)；監(jiān)護(hù)蛋白60 β亞基、α-微管蛋白和2-酮戊二酸雙加氧酶(過氧化物酶)同源物表達(dá)上調(diào)。在潘那利番茄中，幾丁質(zhì)酶表達(dá)上調(diào)，磷酸甘油酸激酶表達(dá)下調(diào)。在鮮豐番茄中，除S-腺苷甲硫氨酸合成酶表達(dá)下調(diào)以外，1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亞基、抗壞血酸過氧化物酶、ATP酶α亞基和尿苷三磷酸-葡糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶均表達(dá)上調(diào)。這些差異蛋白涉及植物的光合作用、離子區(qū)隔化、能量轉(zhuǎn)換、細(xì)胞結(jié)構(gòu)

4、等。結(jié)合已報(bào)道其他植物中這17種蛋白的功能，對(duì)番茄耐鹽機(jī)制進(jìn)行初步探討。 利用聚丙烯酰胺凝膠電泳方法，對(duì)5份不同鹽敏感型番茄材料進(jìn)行POD同工酶分析。 結(jié)果表明，在受到150mM NaCl脅迫后的72h內(nèi)，2份敏鹽番茄POD同工酶譜無顯著變化；2份耐鹽番茄的某些酶帶表達(dá)量先增加后恢復(fù)；一份敏鹽番茄“鮮豐98-7”和耐鹽番茄醋栗番茄雜交F1代經(jīng)鑒定為耐鹽品種，鹽脅迫后72h內(nèi)，某些酶帶表達(dá)量增加，說明番茄耐鹽性與POD同工