鹽芥Th TRXh功能分析和鹽芥不同生態(tài)型的比較蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究.pdf

1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文鹽芥ThTRXh功能分析和鹽芥不同生態(tài)型的比較蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究姓名：孫志賓申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師：趙彥修20060420山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文鹽芥肪7嬲功能分析和鹽芥不同生態(tài)型的比較蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究孫志賓(山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，濟(jì)南，250014)摘要植物在其生活史中要受到各種脅迫的影響，如干旱、溫度、臭氧和紫外線照射、高鹽和病毒侵染等，這些脅迫的發(fā)生常會伴隨ROS的產(chǎn)生和次生性氧化

2、脅迫的發(fā)生。生物體可通過多種調(diào)節(jié)途徑和調(diào)節(jié)方式對生物體的氧化還原狀態(tài)進(jìn)行調(diào)節(jié)，與硫氧還蛋白相關(guān)的氧化還原調(diào)節(jié)是這些調(diào)節(jié)方式中的一種。本論文實驗的第一部分研究了鹽芥硫氧還蛋白基因砌豫鼢的表達(dá)模式，砌黝的原核表達(dá)，GST融合蛋白的純化和活性測定，在擬南芥中過量表達(dá)砌豫砌對擬南芥脅迫耐受性的影響，構(gòu)建了鹽芥勱豫腸基因的沉默表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化鹽芥獲得了轉(zhuǎn)基因株系。鹽芥砌zR砌受各種脅迫誘導(dǎo)表達(dá)，在體外表達(dá)該蛋白具有tr)【活性。對過量表達(dá)鹽芥砌豫勱

3、基因的擬南芥脅迫耐受性分析發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因株系在萌發(fā)階段無論是在甲基紫精還是在NaCl上的萌發(fā)速率都快于野生型，但早期生長狀況都不如野生型；在兩種脅迫處理條件下轉(zhuǎn)基因和野生型根的生長都受抑制，但轉(zhuǎn)基因株系的主根受抑制程度低，側(cè)根分化受抑制明顯。鹽芥砌丁兄砌基因沉默株系已得到，在正常的生長條件下其表型與野生型鹽芥的表型沒有明顯差別。在今后，還有待于進(jìn)行一系列生理生化分析來輔證鹽芥勱豫姍基因的功能。蛋白質(zhì)組學(xué)可以研究許多基因組學(xué)無法研究的層面，

4、如：蛋白質(zhì)的表達(dá)水平、氨基酸序列、翻譯后加工及定位和蛋白質(zhì)的相互作用等，利用蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法已經(jīng)對許多植物如擬南芥、水稻和玉米等進(jìn)行了研究，而鹽芥蛋白質(zhì)組學(xué)的研究還未見報道。鹽芥已成為研究植物耐鹽性的模式材料，已經(jīng)有大量的EsT數(shù)據(jù)可用，鹽芥與擬南芥的近緣性又使得可以用擬南芥的基因組信息及蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫來對鹽芥進(jìn)行檢索。本實驗論文的第二部分建立了一個雙向凝膠電泳結(jié)合蛋白質(zhì)組工作站研究蛋白質(zhì)表達(dá)差異的平臺，優(yōu)化了鹽芥蛋白提取的方法及等電聚